不同类型脑梗死患者血管紧张素—ⅱ2型受体a1675g基因多态性分析

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1、不同类型脑梗死患者血管紧张素一112型受体A1675G基因多态性分析杨国安1孙洪英2和姬苓2王宏坤1陈鹏1(1包头医学院第一附属医院基因诊断屮心内蒙古包头014010)(2包头医学院第一附属医院基因诊断屮心神经内科内蒙古包头014010)【屮图分类号】R743.33【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)26-0037-03【摘要】目的探讨血管紧张素一112型受体(AT2R)基因A1675G单核昔酸多态性与不同类型脑梗死的关系。方法釆用套式等位基因特异性引物PCR技术检测AT2RA1675

2、G单核晋酸多态性,比较和分析病例组与对照组间该基因型及等位基因的分布频率差异,并运用Logistic回归分析脑梗死的危险因素。结果1.脑梗死组G等位基因频率0.292明显低于对照组0.518,P<0.05。2•将脑梗死按OCSP分型分组,各组间比较G等位基因频率,P>0.05o各型脑梗死组G等位基因频率低于对照组,P<0・05。3,Logistic回归分析后,G等位基因降低脑梗死的发生概率,OR值为0.38,P<0.05o结论AT2R基因A1675G单核昔酸多态性对各型脑梗死发病均有保护作

3、用,但对不同类型脑梗死的保护作用无差别。【关键词】脑梗死血管紧张素一112型受体基因多态性OCSP分型脑梗死是遗传因素与环境因素共同作用的疾病,其发病的基因基础已成为研究脑梗死发病机制的新方向。本课题应用病例■对照分析,利用套式等位基因特异性引物(NASP)PCR技术(NASP-PCR)检测AT2RA1675G单核昔酸多态性,探讨其与脑梗死的关系,从分子基因水平为脑梗死易感者的筛检和识别提供依据。1对象与方法1.1对象(1)脑梗死组:來源于2008年3月至2009年10月包头医学院第一附属医院神经内科住院的

4、脑梗死患者。180例,男117例,女63例,年龄32・90岁,平均年龄(64・74&plusnw;ll・72)岁。诊断符合《各类脑血管疾病诊断要点》,并经头颅CT和/或MRI检查证实。排除脑栓塞、脑岀血、严重肝肾损害;(2)正常对照组:为同期来医院门诊体检的健康人群,130例,男84例,女46例,年龄30・80岁,平均年龄(53.49±10.60)岁。除外脑血管意外、严重肝肾功能损害,研究个体间无血缘关系。1.2方法1.2.1AT2RA1675G基因多态性的测定2ml血标本入EDTA-Na2抗

5、凝管,用低渗溶血法提取基因组DNA。利用套式等位基因特异性引物PCR技术(NASP・PCR)检测AT2RA1675GSNP。引物为,P1:5’・GAAGGCTCCCAGTGGACAGAC・3’;P2:5’-CCTAACAAATTAACATAAAAGAA,TC-3’;P3:5’-ACTGTATTTTGCAAAACTCCTA-3’;P4:5’-GAAACAGCAGCTAAATAATTC-3’。PCR反应体系及条件如下

6、:TaqDNA聚合酶6ul,PCR反应混合液10ul制备好的模板DNA2μl。预变性94°C5min,变性94°C30s,退火56°C,30s,延伸72°C30s,共30个循环,最后72°C延伸5min,2%琼脂糖凝胶电泳分型。1.2.2统计学方法应用SPSS17.0软件进行分析。AT2R基因型分布及等位基因频率通过x2检验;计量资料采用t检验;计数资料采用x2检验;采用多因素Logistic回归方法分析AT2R基因多态性对疾病的影响。2结果2.1病例组和对照组基因型及等位基因的分布频率脑梗死组G等位

7、基因频率0.292明显低于对照组0.518,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05)o2.2各型脑梗死比较按Bamford提出的脑梗死OCSP分型分组:I型:腔隙性梗死(LACI),II型:完全前循环脑梗死(TACI),III型:部分前循环脑梗死(PACI),IV型:后循环梗死(POCI)o将脑梗死组各组间比较G等位基因频率,经χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05)o各型脑梗死组G等位基因频率低于对照组,经χ2检验,差异有统计学意义(P<0.05)o2.3多因素L

8、ogistic冋归分析脑梗死患者易患因素以吸烟史、饮酒史、性别、年龄、BMK血压、血脂、血糖以及AT2R各等位基因作为自变量,以是否发生脑梗死为应变量,非条件Logistic冋归分析后,SBP、DBP增加脑梗死的发生概率,OR值为1.17(95%CI:0.02-1.44),1.26(95%CI:1.09-1.46),差异有统计学意义(P<0.05)。G等位基因及高密度脂蛋白降低脑梗死的发生概率,OR值为0.

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