血管紧张素ⅱ1型受体基因某11662fc多态性与冠心病的关系

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1、山西医辩丈学焉士学位论文最后72。C延伸10min。反应产物用1．7％琼脂糖凝胶电泳检测(图1)。限制性内切酶消化酶切反应体系为20ul，其一+lPCR产物6ul，DdeI内切酶(Promega公司提供，10u／u1)0．5ul，RE10×Buffer2ul，BSA(稀释10倍)2ul，二蒸水9．5川【，混匀后37。C酶切4h。8％聚丙烯酰胺凝胶电泳分型按常规方法制备中性聚丙烯酰胺凝胶(交联度29：1，离子强度1×TBE)181,120V恒压，电泳3h，硝酸银染色，脱水后照相保存，分析电泳结果。23M456幽1PCR后I7％琼脂糖凝胶电泳结果：M为pUCl9D

2、NA／MspI(Hpall)Marker，23(由Fermentas公司提供)，l～6为PCR扩增产物(350bp)。(5)冠状动脉造影结果及冠脉狭窄记分冠心病组全部进行选择性冠状动脉造影检查：结果按病变支数分为单支、双支和三支；按积分分为≤4、4～8、>8三组。冠状动脉病变血管损害程度采用Gensini法记分[91。选8支主要的皿管段(左主干、前降支近段、前降支中段、第一对角支、回旋支近段、回旋支中段、右冠脉近段、右冠脉中段。若间隔支、第二对角支、钝缘支及前降支远段中任一血管的直径超过上述8支血管中的任一血管，即用该支血管取代直径较小的血管)。血管评分：所选

3、血管按其最狭窄处评分：0分：狭窄<25％；1分：狭窄25％～49％；2分：狭窄50％74％；3分：狭窄75％～99％；4分：100％(完全闭塞)；最后总分为8支血管记分的总分。若一支血管段多处狭窄，即以Ⅱl西匿辩太学硪士学位论文该段血管最狭窄处记分。3统计学方法计量资料以均数±标准差(x±s)表示。组间基因型及等位基因频率的差异采用X2检验或Fishers精确检验，组问危险因素和生化指标的比较用t检验，多冈素分析采用Logistic回归。用SPSSIO．0软件包进行数据统计。P

4、分析ATIR基因PCR扩增产物为350bp片段，如扩增片段中有1166位A—C替换，则产生DdeI内切酶切点，消化后产生21lbp和139bp两个片段。即AA基因型为350bp一个片段，AC基因型为350bp、21lbp和139bp三个片段，cC基因型为211bp和139bp两个片段。本研究中未发现CC基因型(图2)。Ml234图2为限制性内切酶酶切后电泳结果：MI司图1Marker·1～6、10、11为AA型，7、8、9为AC型。2冠心翩与对照组基因型和等位基因，羹率的比较结果见表1。CHD组AA、AC基因型：频率分别为O．853、0．147：对照组AA、A

5、C基因型频率分别为0．877、0．123，进行x2检验，两组之问AA、AC基因型频率无显著性差异(P>O．05)。CHD组和对照组等位基因频率分别为A0．927、C0．073和A0．939、CO．061，进行x2检验，两组间等位基因频率A、C也不存在显著性差异(P>0．05)。3心肌梗死组与对照组问ATIR基因銎及等位基因频率的比较结果见表2。心梗组和对照组的基因型频率分别为：AAO．866、AC0．132和AA0．877、AC0．123，进行X2检验，两组之间AA、AC基因型分布无显著性差异(P>0．05)。心梗组和对照组等位基囡频率分别为A0．925、C0

6、．075和A0．934、CO，066，进行X2检验，两组间等位基因频率A、C也不存在山西医科大学硬士学位论文显著性差异(P>0．05)。表1CItD组和对照组ATllR基阂型及等位基因频率比较注：与对照组比较：P。>O．05P黼>0．05表2心梗组和对照组ATIR基因型及等位基因频率比较注：与对照组比较：P。>005旷’>0054冠心病不同宿变程度(积分和病变血管数)问gTlR基因型及等位基因频率的比较(1)冠心病组按冠脉病变积分分为三组，各组基因型分布和等位基因频率见表3。进行X2检验，三组间总体比较基因型AA、AC不存在显著性差异(P>0．05)；等位基因

7、频率A、C亦不存在显著性差异(P>0．05)。(2)冠心病组按冠脉病变血管数也分为三组，各组基因型分布和等位基因频率见表4。进行X2检验，三组I、日J总体比较基因型AA、AC不存在显著性差异(P>0．05)；等位基因频率A、c亦不存在显著性差异(P>0．05)。6山西医辩大学磺士学＆论交表3冠心病组冠脉积分与ATlR基因型及等位基因频率的比较组别例数基因掣n等位基因AAACAC沣：二组问总体比较：P23>005P¨>0．05表4冠心病组病变血管支数与ATIR基因型及等位基因频率的比较注：三纽闻总体比较：P。>0．05P黼>O．055冠心病未伴高血压组及伴有高血

8、压组与对照组基因型和等位基因频率的比较