海带素(fgs)的分离纯化、理化性质及生物学功能研究

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1、山东大学硕士学位论文海带素（FGS）的分离纯化、理化性质及生物学功能研究姓名：唐志红申请学位级别：硕士专业：发育生物学指导教师：刘存仁;王海仁2001.5.20海带索(FGS)的分离纯化、理化性质及生物学功能研究唐志红缩略词表FGSFucoidan-galactosansulphate岩藻半乳聚糖硫酸酯CTABHexadecylaidenine十六烷基三甲基溴化铵CPcyclophosphamide环磷酰胺Fucfucose岩藻糖Galgalo,ctosan半乳糖G1u91Hcose葡萄糖Manmannose甘露糖xylxylose木糖Rh

2、arhamnose鼠李糖TCcholesr01晃胆固醇TGtri91yceride甘油三酯HDL—Chighdensity1ipoproteincholesr01．高密度脂蛋白胆固醇LDL—C10Wdensity1ipoproteincholesr01低密度脂蛋白胆固醇第4页共46页海带羹(FGS)的分离纯化、理化性质及生物学功能研究一!查塾■要海带经酶解，除杂，然后加入CTAB(十六烷基三甲基澳化铵)，并结合调pH值，得到三部分沉淀A，、A：和A，。再通过盐解、离子交换层析、凝胶过滤层析等过程，共得到八种较纯的组分：F-、F：、F，、F．

3、、F，、F。、F，和F。．僦酸酚法测得F，一F。含糖量分别为69．0、55．7、55、54．6、、38．0、53．0、49．4和66．O％；比浊法测得s0．’含量依次为：i5．6、27．5、27．3、31．0、12．8、15．4、8和10．5％；利用咔唑比色法测得糖醛酸含量依次为5．2、7．I、6．5、3．3、4．I、2．5、9．3和2．O％；分子筛法确定F。一F1分子量依次为：210、120、228、140、153、290、283和240KD；气相色谱及纸层析证明除F，外，其他七种均以岩藻糖为主，同时还含有数量不等的其它中性糖(半乳糖、甘

4、露糖、木糖和鼠李糖等)；而F，的鼠李糖含量则相对多一些，。利用高碘酸氧化、红外光谱及1H—HMR谱分析等推测FGS是一系列主链由a(1—2)连接的硫酸酯杂多糖．对环磷酰胺所致白细胞降低小鼠模型注射不同剂量的F．，检测结果表明：同对照组相比，实验组的小鼠的白细胞数目恢复较快，脾脏指数明显高于对照组，说明F．对环磷酰胺所造成的白细胞减少有很好的拮抗作用．假注不同剂量的F．，然后再腹注环磷酰胺，结果同对照组相比，、实验组小鼠白细胞下降幅度较小，且恢复快一些，说明F．对环磷酰胺所致白细胞减少有很好的预防作用．对高脂血症小鼠灌胃FGS，然后在不同时间

5、检测血脂变化，在第三十天后，同对照组相比，实验组小鼠血清总胆固醇、甘油三脂、及低密度脂蛋白胆固醇均有较大幅度的下降，高密度脂蛋白胆固醇有较大幅度的升高，在第40天时实验组小鼠的体重明显比对照组轻，这蚓结果充分说明FGS有很好的血脂调节功能和减肥功效．免疫原性实验表明，FGS作为抗原直接激活机体免疫应答的能力很弱．关键词：海带素分离纯化理化性质生物学功能AbstrsctThreecrudefractions(AI、A2andA3)wereobtainedfromlaminariajiponicaareschbyquaternarysaitan

6、dchangingpHvalue．AndtheharvestrateoftotalFGSwastwotimesasmuchasthebeilmethod．EightSinglefractions(Fl—F1)weregotfromA1，A2andA3byionexchangeandgelfiltrationchromatography．TheratioweightSofsugarinFl—Flarerespectively69．0，55．7，55，54．6，38．0，53．0，49．4，and66．O％．SO．2。containedinFl

7、—F。arerespectively15．6，27．5，17．3，31．0。12．8，15．4，8，and10．5％．CarbazolereactionindicatedthaturonicacidinFl—FlarerespectivelY5．2，7．1，6．5，3．3，4．1，2．5，9．3，and2．0％．ThemeleculeweightsofFI—FIaretespectivelY210，120，228，140，153，290，283，and240KD．Gaschromatographyandpaperchromatography

8、suggested，exceptF7，thatotherFl—FImainlycontainedfuc，atthemeaningwhile，differentFGScontain