巢湖蓝藻多糖的分离、纯化及理化性质研究

《巢湖蓝藻多糖的分离、纯化及理化性质研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：孝尚彳签字日期：列阵陟月7日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽大学有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索

2、，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：毒毽拜签字日期：形彤年／2／月7日导师签名：签字日期：矽彤年≮、坳义

3、I

4、侈月＼＼7日万方数据摘要铜绿微囊藻是巢湖水华蓝藻主要组成藻类，其含量能够达到98％以上。铜绿微囊藻在腐殖化过程中会释放大量的有毒有害物质，这对巢湖水体及周围环境造成了严重的环境污染。在直接打捞水华蓝藻仍是治理巢湖富营养化的有效方法前提下，如何充分利用打捞上来的水华蓝藻是摆在人们面前的难题。本文从水华蓝藻中提取多糖这一生理活性物质，这为水华蓝藻处理提供了一条变废为宝、提高综合治理效益的有效新途径。本论文以直接打

5、捞的巢湖水华蓝藻为研究对象，采用反复冻融3次破壁，并通过饱和度为100的硫酸铵溶液去除蛋白质，粗多糖经过DEAE一52和SephadexG150分离纯化其中的水溶性酸性多糖。通过响应面曲线法确定蓝藻多糖的最佳提取优化条件；对纯化过后的蓝藻多糖进行相关性质和结构方面的鉴定和体外抗氧化研究，主要结论如下：1．比较了反复冻融法和溶菌酶法对蓝藻细胞壁的破除效果，结果表明反复冻融法的破除效果强于溶菌酶法。正交试验优化提取条件：采用水提醇沉法提取打捞的巢湖水华蓝藻中的多糖，并通过提取料液比、提取温度、提取时间三个单因素影响试验，确定中心组合实验影响因素和水平；最后通过中心组合试验并采用相应面分析的方法确

6、定蓝藻粗多糖最佳提取工艺：提取温度53。C、提取时间4．3h、提取料液比1：51。2．比较了硫酸铵除蛋白和Savage除蛋白效果。硫酸铵除蛋白效果明显强于Savage法，而且过程中不会使用和产生有毒有害物质。多糖粗提物经过硫酸铵除蛋白(饱和度为100)，多糖粗提物中93％以上的蛋白质含量被去除得到粗多糖。3．蓝藻粗多糖通过DEAE-52纤维素柱交换层析，NaCl洗脱得到酸性蓝藻多糖，透析袋除盐后通过SephadexG150葡聚糖凝胶柱纯化得到相对均一酸性蓝藻多糖CHAP。4．CHAP的紫外光谱表明CHAP不含蛋白质和核酸，红外光谱扫描结果表明CHAP是吡喃糖并具有Q-D-半乳吡喃糖的特征吸收

7、峰。高效液相测定CHAP的分子量为2．209×105，其图谱同时也表明CHAP组分较均一。离子色谱表明CHAP由6．36％的阿拉伯糖、35．47％的葡萄糖、5．03％的木糖、17．09％的半乳糖、27．36％万方数据的甘露糖及一种未知单糖构成。通过高碘酸氧化有甲酸生成，说明含有1-4或卜6糖苷键，从其生成量来看说明CHAP结构中分支较多。甲酸生成量大约是高碘酸的消耗量的二分之一，可以推测此多糖为分支或1—6连接较多的结构，也可能存在不少只消耗高碘酸并不产生甲酸的1—2或1—4键型。5．体外抗氧化实验结果：CHAP对DPPH和超氧自由基有较强的清除能力，其It50分别为276lig／mL和18

8、6．05ug／mL。CHAP对羟基自由基的清除能力较弱，清除率不到10％。关键词：巢湖；蓝藻多糖；理化性质；抗氧化作用II万方数据AbstractCyanobacteriainChaohu，mainlycomposedofMicrocystisaeruginosa，Whosepercentagecompositionismorethan98％．Lotsoftoxicorharmfulsubstancesarereleasedinthedecayingofmicrocystisaeruginosa．ThatwillseriouslydamagesthewaterandairofChaohu．T

9、hedirectsalvageofcyanobacteriaispositiveandeffectivemeasurestocontroltheeutrophicationinChaohu．Howtomakefulluseofthesalvagedcyanobacteriaisoneoftheproblemthatpeoplemusttoface．However,thepolysaccharides，prot