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1、第49卷第1期大连理工大学学报Vol.49,No.12009年1月JournalofDalianUniversityofTechnologyJan.2009文章编号:10008608(2009)01004404甘薯多糖提取纯化及理化性质初步研究田春宇*1,王关林2(1.大连理工大学环境与生命学院,辽宁大连116024;2.辽宁师范大学生命科学学院,辽宁大连116029)摘要:通过正交实验,确立实验室小量、快速、高效提取甘薯多糖的最佳操作条件,建立了一种新的提取方法,即中性条件下,溶液与溶质体
2、积比为2,乙醇与浓缩液体积比为3,浸提时间为2h,浸提温度为65,甘薯多糖提取率大于90%.利用这种改进的提取方法,分离纯化得到一种甘薯多糖.经纸层析、SephadexG200柱层析、紫外扫描、红外光谱分析,确定该多糖为均一多糖,相对分子质量为4.6104,单糖组成为葡萄糖.关键词:甘薯多糖;分离纯化;理化性质中图分类号:Q539.7文献标志码:A0引言中性、酸性和碱性,分别重复3次提取粗多糖,并计算粗多糖含量.甘薯(Ipomoeabatatas(L.)Lam.),植物分浸提时间用2、3、4
3、h,分别重复3次提取粗多类上属于旋花科甘薯属甘薯种草本植物,又名番糖,并计算粗多糖含量.薯、红薯,其块根营养丰富,是我国人民喜爱的粮以A(溶液与溶质体积比)、B(乙醇与浓缩液菜兼用的天然食品.甘薯块根还含有大量黏液物体积比)、C(浸提时间,h)、D(浸提温度,)作研质,包括黏液蛋白、黏液多糖等,它们能保持人体4究对象,按L9(3)(表1)设计正交实验,以最终确心血管壁的弹性,防止动脉粥样硬化的发生,还能立提取条件.保持呼吸道、消化道和关节腔的润滑.近年来,国4外对甘薯营养方面的研究报道较多[1~5],
4、但对甘表1L9(3)正交实验因素水平表Tab.1L49(3)orthogonaltestdesign薯多糖的分离纯化研究尚未见报道.目前,我国学[6~12]因素者对甘薯多糖也开展了初步的研究工作,但水平ABCD有关分离纯化的技术工艺报道较少,仍有待于深111245入研究.222365343485本文研究影响甘薯多糖分离的各种条件,建立一种新的提取纯化方法,并对分离提纯的甘薯1.1.2提取鲜甘薯洗净,称重,切碎,用组织粉多糖理化性质进行初步分析.碎机粉碎,加丙酮脱脂除杂,挥发有机溶剂,然后按照上面
5、确立的提取条件操作,加入适量溶剂,搅1材料与方法拌浸提适当时间,离心得上清液.沉淀的残渣按相实验材料所用甘薯(Ipomoeabatatas(L.)同方法重复浸提1次.合并两次上清液,减压浓缩Lam.)由辽宁师范大学植物生物工程研究所提供.过滤,加适量体积乙醇,静置,离心,得到沉淀,然1.1粗多糖的提取后依次用95%乙醇、无水乙醇各洗脱1次.真空1.1.1提取条件的确立以水做溶剂,调pH至干燥得褐色粉末状粗多糖A1.收稿日期:20070514;修回日期:20081203.作者简介:田春
6、宇*(1974),女,博士生.第1期田春宇等:甘薯多糖提取纯化及理化性质初步研究451.2粗多糖纯化大,为影响甘薯多糖提取的主要因素;其次是A粗多糖用蒸馏水复溶,H2O2去色素,胃蛋白因素;B因素影响较小;影响最不明显的是C因酶Sevag法脱蛋白,再经DEAE52纤维素柱层素.故各因子对提取效果影响大小的顺序是:浸提析,得到纯化的粗多糖样品.温度>溶液与溶质体积比>乙醇与浓缩液体积比1.3理化性质分析>浸提时间.用纸层析法(国产新华层析滤纸)测定单糖组在9个处理组合中,以组合A2B3C1D
7、2所得成;用红外光谱分析法(日本岛津435型红外分粗多糖含量最高,为2.35%(见表4).故本实验中光光谱仪)测定多糖结构;用紫外光谱分析法(上确定浸提条件为溶液pH=7,溶液与溶质体积比海751紫外可见分光光度计)和凝胶层析法为2,乙醇与浓缩液体积比为3,浸提时间为2h,(Pharmacia琼脂糖)测定多糖纯度及相对分子质浸提温度为65.以此条件进行甘薯多糖提取的量;用苯酚硫酸法计算多糖含量.放大实验,其提取率大于90%.2结果与讨论表4正交实验结果Tab.4Resultsofortho
8、gonaltest2.1溶液pH对粗多糖得率的影响因素实验号粗多糖含量/%实验结果表明,在不同pH条件下,甘薯多糖ABCD的得率差异很大.中性条件下粗多糖得率最高,酸1112451.962123652.21性条件下粗多糖得率最低(见表2).分析原因为3134851.53在酸性和碱性条件下,部分多糖被降解.4213851.645224452.15表2不同pH条件下得到的粗多糖含量6232652.35Tab.2Crudepolysacch
