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1、第29卷第5期水产学报Vol.29,No.52005年10月JOURNALOFFISHERIESOFCHINAOct.,2005文章编号:1000-0615(2005)05-0654-05刺参凝集素的分离纯化及其性质李丹彤,宋亮,钟莉,常亚青(大连水产学院农业部海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室,辽宁大连116023)摘要:为探寻刺参药用价值,探索其抑制肿瘤细胞增殖,促进淋巴细胞转化等生物功能。将刺参(Apotichopusjaponicus)经磷酸盐缓冲溶液抽提,20%～75%硫酸铵分级沉淀,SephadexG
2、-200分子筛层析,得到刺参凝集素(AJL)。用SephadexG2200分子筛层析测得其分子量为85652Da。AJL的含糖量为20.9%。该凝集素可以凝集人的A、B、AB、O型红细胞,且对A型红细胞凝集作用最强,在对兔、鼠、鲤鱼、鸡和人的A、B、AB、O红细胞的凝集作用中,对鸡的凝集作用最强。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D2果糖、D2甘露糖、γ2球蛋白、葡萄-1糖、蔗糖、甘露聚糖所抑制,而被牛甲状腺球蛋白所抑制,其最小抑制浓度为1.55mg·mL。该凝集素凝集兔2+2+红细胞的作用不被二价金属离子Ca、Mg及ED
3、TA所抑制。该凝集素在pH4.0～10.14系列缓冲液中均有活性,其中在pH4.4～7.5范围内血凝活性最高。该凝集活性在90℃加热30min后仍然对红细胞有凝集活性,显示出较高的热稳定性。关键词:刺参;凝集素;纯化;性质中图分类号:S986.2文献标识码:AIsolation,purificationandpropertiesoflectinfromApotichopusjaponicusLIDan2tong,SONGLiang,ZHONGLi,CHANGYa2qing(KeyLaboratoryofMaricult
4、ureandBiotechnologyCertificatedbyMinistryofAgriculture,DalianFisheriesUniversity,Dalian116023,China)Abstract:LectinwaspurifiedfromApotichopusjaponicusSelenkabyextractionwithPBS,followedby20%-75%ammoniumsulfatefractionationandmolecularsievechromatographyontheSeph
5、adexG2200.TheLectinhadamolecularweightof85652DaonSephadexG2200andcontainedsacchariedof20.9%.Thelectinwasnonspecificinagglutinationforanytypeofhumanerythrocytes,andthehemagglutinatingactivityforhuman(A)wasthehighest,theagglutinationforchickenwasthehighest,amonger
6、ythrocytesofhumans(A,B,AB,O),rabbits,mouseandcommoncarp.ThehemagglutinatingactivityforrabbitcouldnotbeinhibitedbyD2galactose,glucose,sucrose,mannan,gamma2globulin(human),butinhibitedbybovine2thyroglobulin.The-1minimuminhibitoryconcentrationwas1.55mg·mL.Thehemagg
7、lutinatingactivitywasnotinhibitedbytreatmentwithEDTAand2+2+Ca、Mg.ThislectinhadthemaximumhemagglutinatingactivityatpH4.4-7.5,withactivityatpH4.0-10.14.Thelectinstillshowedaggllutinatingactivityafterbeingtreatedwith90℃for30minutes,indicatingthatithadahighheatresis
8、tance.Keywords:Apotichopusjaponicus;lectin;purification;properties凝集素(lectin)是一类具有糖专一性,可促使鱼类、无脊椎动物。无脊椎动物体内的凝集素最细胞凝集的蛋白质或糖蛋白,其研究历史已有一初是1903年从一种鲎(Limuluspolyphemus)的体[3
