土壤微生物的分离纯化及理化性质的研究

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1、从土壤中分离和纯化细菌、放线菌(华南师范大学生命科学学院10生物技术与工程2班第3组)摘要:土壤是微生物生活的大本营，是寻找有重要应用潜力的微生物的主要菌源。通过采用无菌操作技术，先用稀释法制备土壤的菌悬液，然后结合选择培养基用平板划线法分离出纯菌株，最后用斜面接种的方法对菌株进行保存。通过观察和描述培养特征对菌株所属类群进行初步鉴定，对放线菌进行镜检，对细菌进行革兰氏染色方法观察，以及进行细菌最适合pH生长的初步研究。观察到放线菌的孢子结构；得知该细菌为革兰氏阴性菌，且研究得知该细菌最适合生长的

2、pH是7.48。关键词：土壤；分离；纯化；放线菌；细菌；pHSeparateandpurifythebacteriaandactinomycetesfromthesoilLiuGuoXing，LinQiongfen,MoDan(Biologicaltechnologyandengineering，CollegeofBiologicalScience,SouthChinaNormalUniversity)Abstract:Thesoilisthemicroorganismlifesupremehea

3、dquarters,andisthemainfungussourcetoseektheimportantapplicationpotentialmicroorganism.Throughtheaseptictechnique,usesthedilutionmethodpreparationsoilthefungustohangthefluidfirst,thentheunionchoiceculturemediumseparatesthepurestrainwiththeplatestreakin

4、glaw,finallyusestheinclinevaccinationthemethodtocarryonthepreservationtothestrain.Throughtheobservationanddescribetrainingcharacteristicsonthepreliminaryappraisalbelongsstrainsgroups,actinomycesonanti-bmabacteriatogramstainmethodobservation,andthemost

5、suitableforthegrowthofbacteriapHpreliminarystudy.Wehaveobservedtheactinomycetes’sporestructureandknownthisbacteriumisakindoftheGram-negativebacteria.Besides,throughtheresearchwehaveknownthatthemostsuitablepHforthebacteriumtogrowis7.48.Keywords:soil;se

6、paration;purification;actinomycetes;bacteria;pH引言11土壤是微生物生活的大本营，不同土壤中各类微生物的数量不同，一般土壤中细菌数量最多，其次是放线菌和霉菌。其中，大多数细菌的最适宜pH为6.5-7.5，放线菌一般生活在较干燥、偏碱性、有机质丰富的土壤中。要想从土壤中获得某种微生物的纯培养，可以采用平板划线法进行分离纯化，借助沾有菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物细胞在平板表面分散，经培养得到分散成为由单个微生物细胞繁殖而成的菌落，

7、从而达到纯化目的。利用选择培养基抑制其他菌的生长而使某种菌充分生长的特点，结合牛肉膏蛋白胨培养基和高氏1号培养基可分别选择出细菌和放线菌。通过该实验学习从样品中分离不同微生物的方法，掌握梯度稀释法、平板划线法和斜面接种等方面的无菌操作技术，熟悉对微生物观察与研究的方法，如影印法观察放线菌，革兰氏染色法观察细菌，分光光度计计数法研究细菌的理化性质（pH）等。微生物与人类息息相关，它对人类的假定贡献和无法估量的开发潜力。为我们展开了广阔的应用前景，所以研究微生物的生命活动有着重要意义，其中pH与微生物

8、的生命活动有密切联系[1]。为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将进一步探究pH对微生物的影响。为了更好地为人类的生活和健康做出更大的贡献，将进一步探究pH对微生物的影响。1.材料与方法1.1材料研究材料：土壤（于实验前采集后马上进行稀释，制备菌悬液）1.2方法1.2.1梯度稀释法（稀释）A.称取土样2.00g，在火焰旁加到一个盛有48ml无菌水并装有玻璃珠的100ml锥形瓶中。振荡20-30min，使样品中的菌体、芽孢或孢子均匀分散。静止20-30s，标记为编号1。B.按