angptl4基因在重症急性胰腺炎损伤大鼠肺微血管内皮细胞中的表达和作用

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1、中图分类号密级ANGPTL4基因在重症急性胰腺炎肺损伤大鼠肺微血管内皮细胞中的表达和作用Theroleofangiopoietin—likeprotein4insevereacutepancreatitis—associatedlunginjuryofratsandratpulmonarymicrovascularendothelialcells计：学位论文：75页表格：2个插图：24幅指导教师：陈海龙教授申请学位级别：博士学位干年颦—L—．I．k-=：t土学科(专业)：外科学培养单位：大连医科大学附属第一医院完成时间：二O一三年四月答辩

2、委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不～⋯。一·trJ_●包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：玉≥孤签字日期：竺年』月卫日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允

3、许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密阢／作者签名：王玉器导师签名：c7#胸矗声伊／7叩／阳喟椿奔抛洲飙目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯000⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7第一部分ANGPTL4基因在大鼠重症急性胰腺炎肺损伤中的表达(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7(一)月!J吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·7(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．实验分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．主要设备与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．试剂与药品⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯84．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．1动物模型的制备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．2标本采集方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．3各检测指标及方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯94．4统计学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．SAP大鼠模型制备后，观察大鼠一般情况和组织病理改变⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．1各组大鼠造模后的一般情况的观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．2实验动物的大体解剖观察⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯141．3胰腺和肺组织在光镜下的病理改变⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．各组大鼠动脉血氧分压，血清淀粉酶，ALT检测结果⋯l53．各组大鼠血清TNF．Q

6、，Raf-1的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l54．Angptl4、PPAR—YmRNA基因在肺组织中的表达水平⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l65．肺组织中Angptl4、PPAR—Y蛋白的检测结果⋯⋯⋯⋯186．光镜下胰腺组织和肺组织的病例变化和免疫组化表达变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯197．免疫组化胰腺细胞BCL一2和肺血管壁上VEGF表达变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23第二

7、部分ANGPTL4基因在脂多糖刺激大鼠肺微血管内皮细胞中的表达及其对细胞骨架的影响(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(一)日IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯一24(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯251．实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252．要设备与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．试剂与药品⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯254．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯254．1RPMVECs复苏和培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯264．2R

8、PMVECs鉴定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯264．3MTT比色实验检测LPS干预后RPMVEC的存活率⋯264．4Realtime定量PCR法测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯264．5Wes