柔嫩艾美球虫体

《柔嫩艾美球虫体》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、面物学杂矗ChineseJouraalZoology柔嫩艾美球虫体外脱囊试验和观察采冠吴宝华(新I工医学研究院寄生虫病研究所)(抗州夫学生精采)抽要用机械方法破碎柔嫩艾美球虫卵壹后，其孢手囊可在体接受台0．3％穗蛋白酶和5．o％鸣豫汁(或0．；％猪胆盐)的税壹舟质的作用而引起子孢子税囊。在4l℃条件下，脱囊约需0．5卅·5时脱囊前后的子孢子非常活跃，从斯氏体消失处逸出，在孢子囊空壳中留下一明显残体。，柔嫩艾美球虫(Eimeria~enella)是引起的试验结果，现允绍二种基本洛液的配方。鸡球虫病爆发的主要病原体之一。

2、而脱囊林格(Riager)缓冲液。依韦根贝奇是球虫子孢子侵袭鸡体的一个关键步骤。球虫(Wagenbach)为：NaCI，9．0克；CaCl，0．24的体外脱囊试验，对于搞清球虫的生活史、研究克；KCI，0．42克；KHCO{，0．20克；TRIS，球虫的脱囊机理及其对宿主的侵袭机制等都是3．Oj克；加蒸馏水到lOOO毫升。用lNHcl必要的，同时，也能为球虫的生理生化、细胞生调节pl-I至8,0。物学、免疫学、体外培养和疫苗翩备等方面的研脱囊介质。参考文献井经多次试验，我们究提供活体子孢子材料。提出的配方为：靛蛋白酶

3、(DHco，l：25o)，有关球虫脱囊的研究国内报道不多，而0．03克；鸡疆汁，0．5毫升；加林格缓冲液到lO国外在该领域已有一定研究。莱瓦因(Levine)罐升鸡胆汁可甩0．5％猪胆盐代替最先发现胰腺汁是球虫脱囊的基本物质。古德(二)材料准备柔嫩艾美球虫孢子化卵里奇(Goodrich)和伊泰盖基(Hagaki)发囊的获得和纯化方法嵌朱冠等。孢子囊制取现只有机械硪碎鸡球虫卵囊后，逸出的孢子囊方法为：将一定量提纯干净的球虫卵囊用林格才能受胰酶和十二指肠液的脱囊刺激。奈伯格缓冲液翩成约10毫升悬液，然后用小号(2毫(Ny

4、berg)等则观察到柔嫩艾美球虫的卵囊升左右容量)玻璃匀浆器匀浆处理。每处理几在接触二氧化碳后，卵囊壁会在微孔区域变下即取微量样品于显微镜F观察，至绝大多数薄和产生缺口从而可使脱囊物质穿过。多伦卵囊破裂、孢子囊逸出为止。将悬液用缓冲液(Doran)等和希伯特(Hibbert)m还发现胆冲洗到尖头离心管中，离心(2000转／分钟，10盐和一些表面活性剂可用来代替胆汁成份。后分钟)后，弃去上清，郑得孢子囊沉淀。将沉淀来，王(Wang)等”和用特异性的酶抑制剂研用少许林格缓冲液保存于冰箱中备用。保存时究发现了最基本的脱囊物

5、质不是胰蛋白酶而是间不超过一周。胰凝乳蛋白酶。(三)俸外脱囊观察用约15毫升的脱囊在此基础上，我们作了柔嫩艾美球虫的体介质与适量孢子囊混合，井将其置于16孔塑料外脱囊试验，并对脱囊过程作了观察。培养板的一个孔中。置培养板于重庆产带恒温装置的XSJ—D型倒置研究显微镜镜台上，调一、材料和方法节恒温装置至鸡体温温度4l。在倒置显微t一)基本溶液的配制根据文献及我们镜上观察并拍摄子孢子脱囊过程。根据照片绘观察舀。。隘囊进入高潮，9O分钟后，绝大多数已脱囊完一般性体外脱囊试验可在试管内进行，将毕。试管置于41℃水浴1—2小时

6、即可。脱囊时，胰蛋白酶能消化掉斯氏体，使孢子囊的通透性改变。据斯波趣(Speer)等报；，、}棼．：果秘：讨．谗一”1●道，单独的膨洱或胆盐能激活寄生f哺乳动物参考各种资料拟定的二个脱囊介质配方，细胞内的或游离状态的球虫裂殖子，而胰蛋白经多次试验证明完全可行，其脱囊率可达90西酶则不能。所以，孢子囊内原处于休展状态的一98薅。脱囊介质的配糊和脱囊条件也较简单子孢子主要是受l胆盐的刺激而活化的，胰蛋白和易重复。适于一般实验室进行。酶主要是消化掉斯氏体、使得孢子囊壁对胆盐处理前孢子囊在光镜下斯氏体明显，子孢可逼透。我们认

7、为，胆盐作为表面活性剂可以子折光体清晰(图1)脱囊介质处理卮，新氏改变子孢子细胞臆上的膜蛋白构型和分布状体和子孢子内折光l依逐渐消失(图2)，子孢子杰，从而寻墩了膜蛋自中某些酶原的撤活，并由开始运动。子孢子运动活跃，在孢子囊内互相此触发了一系列的胞内酶原激活过程，使子孢转动、甚至相直扭曲埋绕。然后，两个子袍子通子活化。．过骶氏体消安处先后穿出，中闯相隔一定时间。脱囊盾孢子囊空壳内有残体存在(图2—子孢景穿出速度较快，以至景较难捕捉拍摄。子t6)，扭在许多文献描述中，柔嫩艾美球虫不存在孢干垒逸出后，孢子囊内留有一圆形残

8、体。不孢手囊内、外残体“～。这是由于对柔嫩艾美球久，残体在疆汁和胰蛋白酶的作用下解体成微虫的描述多基在光镜下对卵囊的直接观察。小颗粒(周3—6)。脱囊后子孢子极活跃，在培这时，由于残体的折射率与子孢子相近，故较难养扳上主要作扭曲、旋转和滑行等运动(图6)。分辨和观祭所至。于孢予逸出前后的行为显然是与宿主的肠内环三结论境相适应的。整个脱囊过程最短