鸡柔嫩艾美耳球虫的分离与鉴定研究

鸡柔嫩艾美耳球虫的分离与鉴定研究

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时间:2019-11-25

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1、鸡柔嫩艾美耳球虫的分离与鉴定研究作者曹元元,郭维维,龚加路,刘林帅,杨乐乐,张乐乐指导教师葛凯摘要:取具有球虫病典型症状的病鸡,刮取其肓肠内容物,川离心沉浮法收集鸡球虫卵愛,加入适量的2.5%重锯酸钾溶液,置于29°C±rC的恒温培养箱中培养,定时观察卵囊的发育情况,并测量卵囊的人小,结合病鸡的临床症状和病理变化,计算卵形人小等形态指标,经差异显著性检验(F检验),结杲差异不显著,而冃观察病鸡病理变化,初步鉴定分离到的鸡球虫为柔嫩艾美耳球虫。关键词:鸡,柔嫩艾美耳球虫,分离,鉴定TheIsolationandIdentiflcationofEimeriatenellai

2、nChickenAbstract:Takeatypicalsymptomofcoccidiosisinchickens,scrapingthececalcontents,werecollectedbycentrifugationupsanddownsofchickencoccidiaoocysts,addinganappropriateamountof2.5%potassiumdichromatesolution,placedin29C±1°CintheConstanttemperatureincubator,regularobservationofthedevelop

3、mentofoocysts,andtomeasurethesizeofoocysts,withchickensintheclinicalsymptomsandpathologicalchangesinlaboratorymeasurementsobtainedfromchickensinfectedwithoocystsbodysize,eggsizecalculationformIndicators,thesignificantdifferencetest(Ftest),theresultwasnotsignificant,andtheobservedpatholog

4、icalchangesinchickens,isolatedfromthechickenidentifiedasEimeriatenella.Keywords:chicken,Eimeriatenella.isolation,identification鸡球虫分布范围广,危害人,严重威胁养禽业的发展,每年给全世界养禽业造成超过20亿英镑的直接经济损失⑴,我国在这方面虽无准确的统计,但由于鸡只饲养规模人、数量多,加Z管理粗放,鸡球虫病造成的经济损失相当惊人⑵,因此,许多学者致力于球虫病的研究。集约化养鸡场是球虫病暴发的最适宜场所,其发病率可高达80%以上⑶。鸡球虫病的病原

5、为原虫中的艾美耳科艾美耳属的球虫。鸡球虫病(Coccidiosis)是由多种艾美耳球虫寄生于鸡的肠上皮细胞引起的一种原虫病。木病分布广泛,感染普遍,是鸡群中最常见的,也是危害最严重的寄生虫传染病。据报道,界各国已经记载的鸡球虫种类共有13种之多,我国已发现7种鸡球虫,不同种的球虫,在鸡肠道内寄生部位不一样,其致病力也不相同。其屮致病力最强的为柔嫩艾美耳球虫{Eimeriatenella),寄生于盲肠,其次为毒害艾美耳球虫{E.necatrix)o在fl然发病情况下,多系混合感染,而以某一种占优势。为了研究的方便及研究结果的准确性,往往应用纯种⑸。应用单卵囊分离技术⑺,可

6、进行鉴别球虫的种类和建立球虫的纯种体系。尽管冃前分子生物学技术等一些高科技手段已用于鸡球虫种类鉴定方面的研究,但传统的形态学鉴定方法仍然是不可缺少,并且是可靠的。皖西地区的养鸡业趋于集约化和规模化,鸡球虫病的仍普遍发生。为此我们对皖西地区鸡球虫的利啖进行初步鉴定,对进一步研究球虫的致病性,药物效应和机体对球虫的免疫性等均有重要的意义。1材料与方法1.1实验材料六安市附近某养鸡场提供一只典型球虫病鸡。1.2试剂和仪器2.5%重銘酸钾溶液、饱和食盐水溶液、生理盐水、吸管、40忖铜丝筛、260廿尼龙筛、研钵、平皿、双H生物显微镜(型号:XS-200,江南光电集团)、低速离心机

7、(型号:800,江苏天出有限公司)、电热恒温培养箱等。1.3卵囊的分离与培养取病鸡盲肠,刮取其内容物和黏膜,研碎后加生理盐水搅匀,经40日铜丝筛和260目尼龙筛过滤,滤液2000r/min,离心lOmin,收集沉淀。沉淀置2.5%重珞酸钾溶液中,在29°C恒温培养箱内培养成熟,然后将成熟的卵囊液置4£冰箱屮保存备用。1.4球虫卵囊的接种1.4.1显微镜镜检球虫卵囊数取冰箱中在4°C保存的孑包子化卵囊悬液,2000r/min,lOmin,弃上清,同上速度和时间离心3~4次,洗去重馅酸钾;加饱和食盐水漂浮,吸取上层漂浮液于另一离心管中,加人人

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