kiss1基因在胃癌组织中的表达特点及对胃癌细胞lv87增殖能力的影响

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1、江苏大学硕士学位论文KISS1基因在胃癌组织中的表达特点及对胃癌细胞LV87增殖能力的影响姓名：刘宏伟申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：丁厚中201206江苏大学硕士学位论文中文摘要目的：观察KISSl基因在胃癌组织中的表达变化及转染KISSl基因的胃癌细胞LV87的增殖能力。方法：采用免疫组化法评价71例胃癌组织中及同一患者正常胃组织中的KISSl基因表达特点。构建plRES2．EGFP．KISSl质粒，并转染至胃癌细胞LV87，用流式细胞仪和Westernblot技术鉴定转染效果，四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测胃癌细胞LV87增殖能力。结果：正常

2、胃组织和胃癌组织中KISS．1蛋白的阳性表达率分别为95．8％、74．6％，两者相比，P<0．05；KISS基因的阳性表达与胃癌Borrmann分型、远处转移有关(P<0．05)。流式细胞仪检测提示：转染组细胞绿色荧光蛋白(GFP)的表达率达98％以上；Westernblot检测显示：转染组有KISSl蛋白表达，未转染组无KISSl蛋白表达，MTT检测提示与未转染组相I．匕KISSl基因转染组在转染48小时和72／],时后细胞生长受到明显抑制P<0．05。结论：KISSl基因在胃癌组织中低表达；并成功获得稳定表达KISSl基因的胃癌细胞，为体内外实验研究KIS

3、Sl对人胃癌细胞增殖、侵袭和转移能力的影响提供前提条件：KISSl基因可能有抑制胃癌细胞LV87增殖的能力。关键词：KISSl基因，胃癌，LV87细胞ABSTRACTObjective：ToinvestigatetheexpressionofKISS1geneingastriccancerandtheproliferateabilityofgastriccancercellLV87whichtransfectedKISS1plasmid．Methods：TheexpressionofKISS1geneintissuemicroarrayblockswhichc

4、ontained71gastriccancerspecimenswasdetectedbyimmunohistochemical(IHC)method．Therecombinanteukaryoticexpressionvector(pIRES2-EGFP·KISS1)insertedbythefull-lengthcDNAencodinghumanKISS1geneWastransfectedintohumangastriccancercelllineLV87bylipofectamine．LV87cellsweredividedintogroupAandB

5、．LV87cellsingroupAwerctransfectedwithplRES2-EGFP-KISS1，andgroupBWasthecontrolgroup．Flowcytometry(FCM)andWesternblotwereusedtoidentifytheresultoftransfection．Methylthiazolyltetrazolium(MmWasusedtodetecttheabilityofcellproliferation．Results：IHCshowedthatrateofKISS1geneexpressingongast

6、riccancertissuesandnormalgastrictissuewerc95．8％and74．6％，respectively．．LowKISSlexpressionlevelwassignificantlyassociatedwithgastriccancerBorrmanntypesanddistancemetastases(P<0101)．KISS1geneWaspositiveexpressioninAgroupcomparewithBgroupusingWesternblot．FCMshowedtheexpressionrateofGFPo

7、fAgroupwas98％．MTrshowedthattheproliferationabilityofLV87cellsaftertransfectionwithKISS1Wassignificantlyreducedthanuntransfectioncellsafter48hand72h．Conclusion：KISS1genehasalowexpressionrateingastriccareer．KISS1genemayinhibittheproliferationabilityofLV87cells．Keywords：KISSlgene；Gastr

8、iccancer；LV87cell；I