体外培养的星形胶质细胞在机械损伤后逆分化为神经干细胞的实验研究

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时间:2019-03-03

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1、第四军医大学博士学位论文体外培养的星形胶质细胞在机械损伤后逆分化为神经干细胞的实验研究姓名:杨浩申请学位级别:博士专业:神经生物学指导教师:鞠躬20070501第四军医大学博士学位论文缩略语表缩略语英文全称中文全称ASTastrocyte星形胶质细胞BCAbicinchoninicacid二辛可宁酸BFGFbasicfibroblastgrowthfactor碱性成纤维生长因子BLBPbrainlipid-bindingprotein脑酯结合蛋白BrdUbromodeoxyuridine溴化脱氧尿苷BSA

2、bovineserumalbumin牛血清白蛋白CNScentralnervoussystem中枢神经系统DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜EDTAEthylenediaminetetraaceticacidSodium乙二胺四乙酸二钠EGFpidermalgrowthfactor表皮生长因子FCSfetalcalfserum胎牛血清FITCFluoresceinisothiocyanate异硫氰酸酯GAPDHglyceraldehydes-3-phosphosphatedebydrog

3、enase甘油磷酸脱氢酶GCgalactocerebroside半乳糖脑苷脂GFAPgliafibrillyacidicprotein胶质纤维酸性蛋白Gluglutamicacid谷氨酸MTT3-(4,5-dimethyl-2yl-2.5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide)3-(4.5-二甲基噻唑-20YL)2.5-二甲基四唑嗅盐NSCneuralstemcell神经干细胞ODopticaldensityvalue光密度值PAX6pairedhomeboxtranscripti

4、onfactor6成对同源异形盒转录因子6-1---第四军医大学博士学位论文PFAparaformaldehyde多聚甲醛PLLPoly-L-lysine多聚赖氨酸RAretinoicacid维甲酸RC2radialglialcell2放射胶质细胞识别抗原2RGradialglia放射状胶质细胞SGZsubgranularlayerzone颗粒下层SVZsubventricularzone室管膜下区VZventricularzone室管膜区-2---第四军医大学博士学位论文独创性声明秉承学校严谨的学风与优

5、良的科学道德,本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,不包含本人或他人已申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。论文作者签名:日期:保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定,即:研究生在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属第四军医大学。

6、本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校可以公布论文的全部或部分内容(含电子版,保密内容除外),可以采用影印,缩印或其他复制手段保存论文。学校有权允许论文被查阅和借阅,并在校园网上提供论文内容的浏览和下载服务。论文作者签名:导师签名:日期:--第四军医大学博士学位论文体外培养的星形胶质细胞机械损伤后逆分化为神经干细胞的实验研究博士研究生:杨浩导师:鞠躬教授第四军医大学全军神经科学研究所,西安710032摘要神经干细胞(NSC)移植是目前被认为是治疗中枢神经损伤最有临

7、床应用前景的细胞,但NSC的来源、致瘤性以及移植后的排异反应等诸多方面的问题又面临着巨大的挑战。研究发现:在神经系统损伤(机械性、化学性或病理损伤)时,损伤区周围的AST能够表达nestin,且呈现神经前体细胞或NSC特性,经过培养可以获得NSC,这一现象的发生机理不甚清楚。据推测可能与AST周围分子微环境变化引起其逆分化有关。因此AST逆分化的特性为神经系统损伤修复、退行性疾病及脑肿瘤的治疗提供了一条蹊径。本实验目的是通过模拟体内建立体外的损伤模型,观察AST在机械损伤区和远离损伤区的nestin表达的

8、变化及逆分化形成NSC的情况,同时应用损伤AST培养体系产生条件培养基来干预正常生长的AST,进一步研究正常生长AST形成神经前体细胞/NSC情况以及AST逆分化的可能性。最后采用蛋白技术对条件培养基的活性进行筛选分析,探讨诱使AST逆分化的细胞因子及可能存在的作用机制。为下一步从蛋白和基因水平研究引起AST逆分化为NSC的分子机制打下基础,也为临床上采用促AST逆分化活性分子治疗神经损伤提供理论依据。本研究共分为五部分。在第

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