aqp4基因沉寂治疗早期缺氧缺血性脑水肿的dwi影像学研究

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1、AQP4基因沉寂治疗早期缺氧缺血性脑水肿的DWI影像学研究计:学位论文:34页表格:4个插图:15幅李洪杰指导教师:边杰教授申请学位级别:硕士学位专业名称:影像医学与核医学论文提交日期:2012年4月学位授予单位:大连医科大学论文答辩日期:2012年5月学位授予日期:2012年6月评阅人:答辩委员会主席:独创性声√㈣Y228㈣31170本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位

2、或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:茎楚:签字日期:旦年上月竺日关于学位论文使用授权的说明《力梢园媚籼辅凝挑协瓶研黟p燃乡褊》系本人在大连医科大学攻读(博士、硕士)学位期间在导师指导下完成的学位论文。本人及指导教师完全了解大连医科大学关于保存、使用学位论文的规定,同意学校保留并向有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版本,允许论文被查阅和借阅,同意学校将本论文加入:1.中国学术期刊(光盘版)电子杂志社——《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文

3、数据库》及CNKI相关数据库。2.中国科学技术信息研究所一《中国学位论文全文数据库》3.国家图书馆本人授权大连医科大学,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存、汇编学位论文,可以公布论文的全部或部分内容。论文作者签名:指导教师签名:签字日期:苔戍高二垄垄一勘胁年罗月江日AQP4基因沉寂治疗早期缺氧缺血性脑水肿的DWI影像学研究硕士研究生:李洪杰指导教师:边杰教授专业名称:影像医学与核医学摘要目的:通过观察早期磁共振弥散加权成像(diffusionweightedimaging,DWI)图像及表观弥散系数(ApparentDiffuseCoeffi

4、cient,ADC)图像的影像特点并监测ADC值的变化规律,从而探讨水通道蛋白一4(Aquaporin.4,AQP4)基因沉寂对新生猪缺氧缺血性脑损伤(hypoxic—ischemicbraindamage,HIBD)的干预效果,进而研究早期缺氧缺血性脑损伤AQP4mRNA表达的变化及意义。材料与方法:新生健康清洁级约克种猪40只(日龄3.5天,体重1.3—1.6kg,雌雄不限,由大连华侨种猪场提供)随机分成实验组及对照组(每组20只)。其中12只种猪(实验组5只及对照组7只)在实验过程中由于缺氧、手术创伤等原因死亡,实验组中2例因注射药物失败

5、列入对照组,最终实验组13例、对照组15例。实验组给予脑室注射siRNA.AQP4(AQP4干扰序列)+缺氧缺血(双侧颈总动脉永久结扎+4%低氧通气30rain),对照组给予siRNA-Negative(AQP4非干扰序列)+缺氧缺血。术后给予青霉素肌肉注射预防感染。两组种猪均根据具体情况酌情喂养,以保证充足的热量及液体供给。模型制备结束后,采用1.5TMR扫描仪扫描,使用标准头线圈,冠状位扫描。分别在缺氧缺血后Oh、1h、3h、6h、9h及12h时间点进行MR扫描;扫描序列包括T1加权像(T1WI)、T2加权像(T2WI)、FLAIR及DWI

6、。其中DWI扫描参数如下:TR6000ms,TE91.1ms,层厚4mm,2次采集,矩阵128x128,b值分别为0/1000s/ram2。将采集后的原始图像传送至GEadvantageworkstationAW4.4工作站上进行后处理,分别于双侧大脑半球额叶皮层、脑室旁及海马区域选择感兴趣区(Regionsofinterest,ROI),测量并得到ADC值。所有时间点扫描结束后给予3%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后断头取脑。一侧脑组织进行SP免疫组织化学染色,光镜下观察病理改变;另一侧行实时荧光定量PCR(RT.PCR)检测,观察脑组织中目的基因的

7、表达情况,检测待测样品的Ct值。应用社会科学统计软件包(statisticspackageforsocialscience,SPSS)16.0版进行数据分析:对两组间不同部位及不同时间点的ADC值进行重复测量方差分析方法进行检验;对两组间相同部位AQP4mRNA相对表达量及Ct值进行独立样本T检验;对两组的不同部位间AQP4mRNA相对表达量及Ct值进行配对样本T检验。结果:1.实验组大脑额叶皮层、海马区及侧脑室旁区域未见明显高信号,且各时间点ADC值无统计学差异(p>0.05);对照组各区域出现不同程度高信号,相应的ADC值均不同程度的减低,

8、表现为:l小时内下降明显,3小时最低,6小时开始回升,12小时接近正常,且各时间点之间差异有统计学意义(p

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