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时间:2019-03-02
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1、分类号学号M200975824学校代码10487密级硕士学位论文TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系的体外作用机制申请人姓名:钱敏学科专业:妇产科学指导老师:汪辉教授答辩时间:2012年5月POSTGRADUATEDISSERTATIONThemechanismofTMTP1-TAT-NBD’seffectsonovariancancercelllinesinvitroCandidate:QianMinMajor:ObstetricGynecologyTutor:Prof.WanghuiCanc
2、erbiologyCenter,TongjiMedicalSchool,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan,Hubei430030,P.R.ChinaMay,2012独创性声明本人郑重声明,本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起
3、的一切法律后果。学位论文作者签名:日期:年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□,在_____年解密后适用本授权书。本论文属于不保密□。(请在以上方框内打“√”)学位论文作者签名:指导教师签名:日期:年月日日期:年月日目录第一部分:TM
4、TP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系的体外作用机制中文摘要………………………………………………………1英文摘要………………………………………………………2前言…………………………………………………………..4材料和方法……………………………………………………5结果………………………………………………………….12讨论………………………………………………………….18参考文献……………………………………………………...22第二部分:NF-κB通路及其亚单位在癌症中的作用综述…………………………………
5、……………………….25致谢………………………………………………………….39华中科技大学硕士学位论文第一部分TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系的体外作用机制摘要【目的】研究TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌耐药细胞系C13K及配对敏感细胞系OV2008的体外作用机制,为抑制卵巢恶性肿瘤探寻一种新的小分子靶向药物。【方法】FITC-TMTP1分别作用卵巢癌细胞系C13K和OV2008后,激光共聚焦显微镜观察单肽亲和力;MTT法检测TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系的增殖抑制情况;集落形成
6、试验检测TMTP1-TAT-NBD抑制卵巢癌细胞系克隆形成的情况;流式细胞学检测TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系的凋亡作用;WesternBlot法检测TMTP1-TAT-NBD对卵巢癌细胞系中NF-κB蛋白的表达;NF-κB激活-核转运法检测TMTP1-TAT-NBD抑制卵巢癌细胞C13K中NF-κB基因的激活。【结果】TMTP1对卵巢癌耐药细胞C13K有靶向性,对其配对敏感细胞OV2008靶向性差。TMTP1-TAT-NBD可以明显抑制卵巢癌细胞C13K和OV2008的增殖(P<0.05
7、)和克隆形成(P<0.05),并且能够促进两株细胞的凋亡(P<0.05),且TMTP1-TAT-NBD的作用有浓度依赖性,同时TMTP1-TAT-NBD对C13K的作用较OV2008明显。WesternBlot法检测TMTP1-TAT-NBD作用后的卵巢癌细胞C13K中的NF-κB蛋白的表达,发现有明显的下调(P<0.05),而OV2008中NF-κB蛋白表达无明显改变。NF-κB激活-核转运检测显示TMTP1-TAT-NBD可明显抑制NF-κB的核转运(P<0.05),即其抑制NF-κB基因的激活
8、。【结论】TMTP1-TAT-NBD在体外对卵巢癌细胞系有很好的治疗作用,其机制是由于TMTP1-TAT-NBD可以抑制NF-κB基因的激活,进而抑制细胞的增殖和克隆形成,促进细胞的凋亡。【关键词】TMTP1TMTP1-TAT-NBD靶向治疗卵巢癌NF-κB1华中科技大学硕士学位论文ThemechanismofTMTP1-TAT-NBD’seffectsonovariancancercelllinesinvitroAbstractObjective:Toinvesti
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