黄褐籽甘蓝型油菜种子成分比较研究

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1、邵彦林：黄褐籽}j‘蓝型油菜种子成分比较研究摘要甘蓝型油菜(BrassicanapusL．)是一种重要的油料作物，种子中含有大量的抗营养物质，如多酚、木质素、纤维素、芥子油苷和植酸。这些抗营养物质的存在影响了菜籽油的品质，同时降低了菜籽饼粕的营养价值。相比于褐籽油菜，黄籽油菜具有许多优点，如较低的多酚、木质素和纤维素含量，较高的蛋白质含量和含油量。因此选育高品质的黄籽油菜，研究其形成的分子机理对油菜育种至关重要。本实验室通过细胞工程方法将芸薹属外的黄籽种质引入褐籽甘蓝型油菜，形成了新的黄籽甘蓝型油菜株系。通过对黄、褐籽甘蓝型油菜种子代谢组学的分析，可以为以后研究

2、黄籽性状形成的分子机理奠定基础。为了分析黄、褐籽甘蓝型油菜种子代谢产物差异，我们结合当前最新仪器分析技术，进行了油菜种子品质分析。首先我们进行了油菜种子多酚物质萃取条件的研究，通过不同萃取溶剂，不同萃取温度和不同萃取方法的研究，确定了80％丙酮水溶液在室温条件下超声裂解萃取为多酚萃取条件；其次我们使用高效液相色谱质谱联用分析技术，结合多酚物质紫外吸收特性，多级质谱裂解信息，高分辨质谱信息和多酚碱性水解后物质变化的信息对甘蓝型油菜种子多酚物质进行了分析，总共发现了91种类黄酮和羟基苯丙烯酸衍生物，确定了78种，其中55种为甘蓝型油菜中首次报道，24种为芸薹属植物中

3、首次报道；我们通过组织化学染色分析，化学分析法分析和高效液相色谱质谱联用分析，对黄、褐籽甘蓝型油菜种子发育过程中多酚物质含量差异进行了比较分析，发现油菜籽中存在的多酚物质主要分为三类，即黄酮醇类、羟基苯丙烯酸类和原花色素类(包括单体表儿茶素)，含量最多的是羟基苯丙烯酸类物质，其在黄、褐籽中的含量差异不明显；原花色素类物质含量次之，其在黄、褐籽中的含量差异很大；黄酮醇类的含量最少，但其在黄、褐籽中的含量差异明显。发现不同种皮颜色的种子其多酚物质含量差异巨大，某些单一多酚物质含量差异可达十倍以上(例如表儿茶素)；使用气象色谱质谱联用分析技术，我们分析了黄、褐籽甘蓝型

4、油菜种子发育过程中脂肪酸含量的差异，发现油菜籽脂肪酸含量随着种子的发育逐渐积累，在开花五周后含量突然下降，在发育末期又逐渐增加。同时发现黄籽油菜种子各种脂肪酸含量普遍高于褐籽。最后，我们使用红外光谱分析技术和核磁共振波普分析技术，研究了甘蓝型油菜不同株系及亲本种子和种皮脂质、蛋白质、木质素和纤维素含量的差异，发现黄籽株系各种成分的含量介于亲本褐籽甘蓝型油菜和白芥之间。通过对黄、褐籽甘蓝型油菜种子多酚、脂肪酸、脂质、蛋白质、木质素和纤维素等成分的分析，我们确定细胞工程方法选育的黄籽甘蓝型油菜株系具有高蛋白，高含油量和低扬州人学硕J二学位论文多酚的优良品质。同时，发

5、现黄籽株系中某些类黄酮合成相关基因的表达量与类黄酮含量密切相关。关键词：甘蓝型油菜，液质联用分析，类黄酮，羟基苯丙烯酸衍生物，脂肪酸，纤维素，木质素邵彦林：黄褐籽甘蓝型油菜种子成分比较研究AbstractIIIIlllllqlllllLIIIIILIIIILILIIIIIIIqlllllllllY2632996Rapeseed(BrassicanapusL．)isallimportantoilcropintheworld．Anti·nutrientsareabundantinseedsofBrassicanapus，mainlyincludingpolyphen

6、olics，lignin，fiber,glucosinolates，andphyticacid．Theexistenceoftheseanti—nutrientsgreatlyaffectsthequalityofrapeseedoil．aswellasthenutritionalvalueofrapeseedmeal．Comparingwithblack-seededrapeseedcultivars，yellow—seededrapeseedhasseveraladvantages，includinglowerpolyphenols，ligninandfib

7、ercontents，higherproteinandoilcontents．Thus，developmentofrapeseedwithyellowseedcharacter,aswellasthedissectionofyellow-seededrelatedmolecularmechanism，issignificanttorapeseedbreeding．Inthisresearch，weusedtheyellowseedlinesselectedfromsomatichybridsofBnapusandSinapisalbaasplantmateria

8、l，whichweret