盘羊供体细胞对异种核移植效率的影响

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1、中国农业科学2008,41(9):2798-2805ScientiaAgriculturaSinicadoi:10.3864/j.issn.0578-1752.2008.09.031盘羊供体细胞对异种核移植效率的影响12112221潘晓燕，杨梅，张寒莹，王正朝，汪立琴，陈童，郭志勤，王锋12（南京农业大学动物胚胎工程技术中心，南京210095；新疆维吾尔自治区畜牧科学院/农业部家畜繁育生物技术重点开放实验室，乌鲁木齐830000）摘要：【目的】利用核移植技术生产异种重构胚，研究供体细胞对异种核移植效率的影响。【方法】以新疆盘羊和绵羊耳皮肤组织建立成纤维细

2、胞系，进行细胞遗传学分析；以来自不同个体、不同代次、不同汇合度和不同保存方式的盘羊成纤维细胞为核供体，当地绵羊卵母细胞为受体，进行异种重构胚的构建。【结果】来自3只盘羊耳皮肤成纤维细胞的异种重构胚的卵裂率与囊胚率均无显著差异；采用10代以内的细胞作为核供体，细胞代次不会影响重构胚的发育率；生长到70％～80％汇合的供体细胞重构胚的囊胚率显著高于刚完全汇合组和汇合2～4d组；将供体细胞4℃保存2d，虽降低了卵裂率，但囊胚率没有受到显著影响；盘羊的染色体数目为2n=56，核型式为4（M）+50（T），XY（T，M）；绵羊的染色体数目为2n=54，核型式为6（

3、M）+46（T），XY（T，M）。【结论】利用本试验中的3只盘羊耳成纤维细胞，培养到10代以内、70％～80％汇合后用于构建异种重构胚，能得到较高的早期胚胎发育率。关键词：盘羊；体细胞核移植；成纤维细胞；染色体核型；胚胎发育EffectsofArgali(Ovisammon)DonorCellsonInterspeciesNuclearTransfer121122PANXiao-yan,YANGMei,ZHANGHan-ying,WANGZheng-chao,WANGLi-qin,CHENTong,21GUOZhi-qin,WANGFeng12(Cent

4、erofAnimalEmbryoEngineeringandTechnology,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095;KeyLaboratoryofAnimal&VeterinaryBiotechnologyofMinistryofAgriculture,AnimalScienceAcademyofXinjiangUygurAutonomousRegion,Urumqi830000)Abstract:【Objective】Theaimofthisstudywastoinvestigatetheeffec

5、tofpassagenumber,confluencyandstoragemethodofargali(Ovisammon)fibroblastsfromdifferentindividualsondevelopmentofembryos.【Method】Theembryoswerereconstructedbyinterspeciesnucleartransferusinglocalovineoocytecytoplasm.Fibroblastswerederivedfromskinofadultargalisheeps’earinXinjiangwh

6、iletheywereanalysizedbychromosomekaryotype.【Result】Therewasnodifferenceinthecleavagerateandblastocystrateamongthreetheargalisheep.Thepassagenumberoffibroblastcellswithin10passagesdidn’taffectthedevelopmentrateofreconstructedembryos；Theblastocystrate,whichwasproducedusing70%-80%co

7、nfluentfibroblastcells,washigherthanthoseusingfull-confluencycellson0dand2-4d.Thecleavagerateofembryosreconstructedusingdonorcellsstoredfor2daysat4℃waslowerthanthatusingdonorcellsfromcontrolgroup(P＜0.05),butnodifferencewasfoundintheproportionofblastocystsintotalembryos.Chromosome

8、numberofargali(Ovisammon)andlocalsheepis