自杀基因修饰的内皮祖细胞对小鼠原位移植性肝细胞癌的治疗初探

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1、隶。轫大·嘤硕士学位论文万方数据自杀基因修饰的内皮祖细胞对小鼠原位移植性肝细胞癌的治疗初探f碱㈣4㈥㈣万方数据：Y2707468Pre-testTreatmentofEndothelialProgenitorCellsModi6edbySuicideGeneonGro、ⅣthofHepatocellarCarcinomain01曲otopicTumor-transplantedMouseAThesisSubmittedtoSoutheastUniVers时FortheAcademicDegreeofMasterofM

2、edicineBYZHUHongyanSuperVisedbyProfessorJIANGZaoMedicalSchoolofSoutheastUniVers时May2014万方数据东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研

3、究生签名：』墼堕日期：翌!!：苎：兰东南大学学位论文使用授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可以公布(包括以电子信息形式刊登)论文的全部内容或中、英文摘要等部分内容。论文的公布(包括以电子信息形式刊登)授权东南大翱触恸玑一擞：挝一缒隰U．，．．1扩，娩研究生签名：=聋蟛师签名：暨型2日期：础

4、≮，o警，≯毛万方数据中文摘要自杀

5、基因修饰的内皮祖细胞对小鼠原位移植性肝细胞癌的治疗初探东南大学医学院研究生：朱洪艳导师：姜藻教授【研究目的】本课题研究自杀基因胞嘧啶脱氨酶(cytosinedeaminase，cD)基因转染的小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)联合酶前体药物5一氟胞嘧啶(5-fluorocytosine，5一Fc)对小鼠H22细胞原位移植性肝细胞癌的抑制作用。初步探讨CD基因修饰的内皮祖细胞联合5．FC对小鼠原位移植性肝细胞癌的治疗效果。【研究方法】1．分离小鼠骨髓源性EPcs，培

6、养鉴定后，采用Polybrene技术转染含cD基因的慢病毒载体重组体plenti6．3．EGFP。cD至EPcs，荧光显微镜下观察基因转染情况。在不同浓度5．FC及不同作用时间下，利用CCK．8法检测转染CD基因的EPCs上清液联合5-FC对肝癌H22细胞体外增殖能力影响。2．腹水细胞法制作c57BL／6小鼠原位移植肝细胞癌模型，尾静脉注射转染cD基因的EPcs和5．Fc联合治疗肝癌模型鼠，观察移植瘤体积重量变化，计算抑瘤率。TuNEL法检测肿瘤凋亡，Westemblotting检测CD蛋白表达。【研究结果】】．成功

7、转染CD基因至EPCs，荧光显微镜下呈现绿色荧光。CCK．8法检测显示随着5．FC浓度增加，经cD基因转染的EPCs上清液处理的H22细胞增殖逐渐下降，5．FC浓度达100mg／L时，肿瘤细胞增殖抑制率达到约(50．70士4．47)％(P<0．05)；随着作用时间的延长，经CD基因转染的EPCs上清液处理的H22细胞增殖明显减少(P<0．05)。2．小鼠原位移植肝癌模型成瘤率为100％；转染cD基因的EPcs实验组小鼠瘤体组织CD蛋白阳性表达，肿瘤生长受到抑制，肿瘤重量和体积抑制率分别为(45．81士9．92)％和(

8、61．27士13．29)％(P<0．05)，肿瘤细胞凋亡率为(39．98士5．13)％。【结论】cD基因修饰的EPCs联合5．FC作用体外实验可抑制肝癌H22细胞增殖；尾静脉注射T万方数据东南大学硕士学位论文CD基因修饰的EPCs联合5．FC作用可抑制原位移植性肝细胞癌小鼠的瘤体生长，诱导肿瘤细胞凋亡。【关键词】肝细胞癌；自杀基因；慢病毒载体；内皮祖细胞；原位移植II万方数据英文摘要ABSTRACTPre-test1阡eatmentofEndothelialProgenitorCeUsModi6edbySuicide

9、GeneonGrowthofHepatocellarCarcinomainorthotopicTumor_transpIantedMouseMedicalschoolofSoutheastUniVersityGraduate：ZHUHongyan【objective】Supen，isor：ProfessorJMNGZaoTbinVestigat