西洋参愈伤组织培养及其次生代谢物的研究

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1、吉林农业大学硕士学位论文西洋参愈伤组织培养及其次生代谢物的研究姓名：孙春玉申请学位级别：硕士专业：生物物理学指导教师：张美萍20040601吉林农业大学硕士论文西洋参愈伤组织培养及其次生代谢物的研究摘要西洋参又称花旗参、美国人参。为五加科人参属植物。具有提高免疫力、强心、降血脂、造血等医疗作用。其主要活性成分为次生代谢物一人参皂苷类，目前尚未人工合成。西洋参虽早有栽培，但生长期较长，且受病虫害、气候、环境及栽培技术多方面的限制，产品远不能满足市场所需，且价格昂贵。因此利用现代细胞工程技术对西洋参进行

2、细胞和组织培养已成为解决这一问题的途径之一。本文以西洋参幼胚为外植体，研究了西洋参愈伤组织诱导和愈伤组织固体培养、悬浮培养时，不同物理、化学因子对培养物生长和次生代谢产物形成的影响，从而得出适合西洋参幼胚愈伤组织诱导、愈伤组织固体培养、愈伤组织悬浮培养的条件。综合上述研究，得出如下结论：1．诱导西洋参幼胚愈伤组织的适宜生长素为2，4-D，浓度为3mg／L；细胞分裂素为BA或KT，浓度分别为0．5mg／L和0．3mg／L。最适温度为23±1。C．黑暗条件。说明了西洋参幼胚愈伤组织的形成是一个外植体、基

3、本培养基、生长调节物质和外界环境条件等各因素之问相互作用的过程。2．愈伤组织固体培养的条件为MS+2，4-D2mg／L+BA0．5mg／L，温度为239[3．暗培养。其生长曲线基本符合“s”型。3．固体培养中低浓度的2，4-D对皂苷的合成有促进作用；与KT配合使用，对皂苷合成促进作用明显。4．蔗糖利于西洋参愈伤组织生长和皂甙合成，西洋参培养物细胞吸收、利用蔗糖的能力比其它糖类强，其使用的最佳浓度为3％。5．愈伤组织悬浮系最适培养基为MS+2，4一D0．5mg／L+IBA2mg／L+BA0．5mg／L

4、。其生长曲线基本符合⋯S’型。6-利用二次饱和D～最优设计和回归分析得出愈伤组织悬浮培养时转速为106rpm，pH值为6．07，接种量为0．759／20ml时是最佳的组合。关键词西洋参愈伤组织培养皂苷宣茎奎些查兰堡圭!!苎亘堂墨堕堕望塑撞鲞墨基姿生垡塑塑塑堡塞AbstractPanaxquinquefoliumL．isalsonamedAmericanginsen，itbelongstoAraliacas、Panax．PquinquefoliumL．hasbeenusedasmedicinalher

5、bsfor300years，themajorfunctionalcomponentofPquinquefoliumL．isginsenoside．PanaxquinquefoliumL．hasbeencultivatedforlongtime，butitsgrowthperiodisverylong，anditissensitivetoinsect、enviroment、andweatheretc．theyieldcannotmeettheneed．Oneofwaysthatsolvethispro

6、blemiscarryingoutcellandtissueculturebyusingcellengineering．Thispaperstudiedtheeffectsofsomephysical、chemicalfactorsonthecallusgrowthandsaponincontentincourseofcalfiinduced、solidcalluscultureandsuspensioncallusculturewiththeyoungembryoofPanaxquinquefol

7、iumL．．Theresultsshowed：2，4-DandBAarebetterthanotherauxinandcytokininforcallusinducing，themostsuitableconcentrationofthemare3mg／LandO．5mg／Lrespectively；23士1℃．dark．ThecallusinducingofPanaxquinquefoliumL．’syoungembryoisthecourseofinteractionofexplant、grow

8、thfactors、nutritionalfactorsandenvkonmental．MS+2，4-D2mg／L+BA0．5mg／Land23℃．darkarethebestconditionforsolidcallusculture．Thegrowthcurveturnson⋯s’appearance．Lowconcentrationof2，4-Dcanimprovesaponincontent；2，4-DassociatedwithKT，saponinconte