黑曲霉xz-3s木聚糖酶基因工程菌的构建、高效表达及重组酶性质研究

《黑曲霉xz-3s木聚糖酶基因工程菌的构建、高效表达及重组酶性质研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据单位代码：10472学号：1217005学术学位团中图分类号：Q2专业学位口：密级：公开拓浙嚣学浣硕士学位论文黑曲霉x乙3S木聚糖酶基因工程菌的构建、高效表达及重组酶性质研究Ef丘cientExpressionandCharacter娩ationofTwoXylanases譬romAspergiHHsniger飞0乙·3shIPichinpnstoris作者姓名：王丹丹导师姓名：周晨妍学科门类：理学专业名称：生物学培养院系：生命科学技术学院完成时间：二。一五年四月万方数据Efj丘cientExpressionandCharacterizationofTwoXylanases

2、from彳印P馏批刀瞎e，XZ-3Sin黝缸p嬲torisAThesisSubmittedfortheDegreeofMaLsterCandidate：WangDandanSupenrisor：Prof．ZhouChenyanSch001ofLifeScienceandTeclulologyXill)【iangMedicalUniVersi锣万方数据新乡医学院学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已

3、在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者虢易解‘，日期：砖钿／日本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权新乡医学院可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密日／储虢砂加么，，～日强。碍1年占只

4、B导师签名‘

5、司黑啊隰mf乒日万方数据目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯．1Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯；⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6fjU吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯()1材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．243讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．554结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57参考

7、文献．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．63附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．74致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．75个人简历⋯■⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯76万方数据新乡医学院硕士学位论文摘要背景木聚糖酶(Xylanase)【EC3．2．1．8】在木聚糖降解过程中作用非常重要，能够将木聚糖降解为木糖和低聚木

8、糖。其在环境、食品、饲料、能源、造纸等行业均有广泛的应用。产木聚糖酶的微生物分布很广，不同来源以及不同种类的木聚糖酶具有不同的催化特性，使用各种手段来提高木聚糖酶的产量并降低其生产成本，是亟待解决的问题。目的构建木聚糖酶毕赤酵母基因工程菌，优化工程菌产酶条件，实现木聚糖酶的高效表达：分析重组酶的酶学性质，为木聚糖酶的工业应用提供理论依据。方法1．毕赤酵母工程菌构建将4．疗咖，．)(z一3S木聚糖酶基因缈ZB2和砂"Zp3重组到真核表达载体pPIC9K上，线性化后，分别电击转入毕赤酵母GSll5和KM71中，G418初筛、摇瓶复筛出4株木聚糖酶高产菌株。2．工程菌发酵条件的优化对重组

9、菌产酶的接种时间、诱导温度、发酵培养起始pH、甲醇诱导浓度、诱导时间等进行单因素优化，在此基础上进行正交和响应面综合试验。3．重组酶酶学性质的分析测定重组酶的最适作用温度、最适作用pH、热稳定性、pH稳定性以及金属离子和EDTA对酶的影响，通过薄层层析分析重组酶的水解产物，测定重组酶的动力学常数。结果1．成功构建4种木聚糖酶工程菌，分别命名为GSll5／pPIC9K．2、GSll5／pPIc9K_3、量a订7l／pPIc9K一2、Ⅺ订7l／pPIc9K-3，并成功实现