胡黄莲苷ⅱ对大鼠脑缺血损伤后基质金属蛋白酶-9表达的影响

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1、胡黄连苷II对大鼠脑缺血损伤后基质金属蛋白酶一9表达的影响摘要日的：探讨胡黄连苷II对大鼠脑缺血损伤后基质金属蛋白酶一9(matrixmetalloproteinase9，删P一9)表达的影响，并优化最佳治疗剂量和时问窗。方法：将174只W／'S≠ar大鼠随机分为脑缺血组(模型组)(n--5X3)、正常对照组(n5X3)和胡黄连苷II治疗组(n=16×3×3)，应用双侧颈总动脉结扎法(bi】ateralcommoncaretidarteryocchsiOil，BCCAO)建立大鼠前脑缺血动物模型，按正交试验设计将治疗组大鼠分组，并经腹腔注射相应剂

2、量的胡黄连苷II干预治疗。用苏木精一伊红(haematoxylineosin，HE)染色观察各组大鼠脑组织神经细胞的形态结构：透射电子显微镜(transmissionelectronmicroscopy，TEM)观察各组大鼠脑组织超微结构；免疫组织化学(immunohistochemistry，InC)染色和蛋白免疫印迹法(WesternBlotting，WB)检测各组大鼠脑组织删P一9蛋白表达水平；逆转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-PCR)检测各组大鼠脑组织删P一

3、9mRNA转录水平。结果：与对照组相比，模型组火鼠脑组织中MMP一9表达水平明显增高，脑组织损伤程度严重。经胡黄连苷II干预后，治疗组大鼠脑组织MMP一9表达水平较模型组明显降低，脑组织结构明显改善，损伤减轻。胡黄连苷1I治疗脑缺血损伤的最佳疗效：依据HE染色结果分析为脑缺血2．0h腹腔注射lOmg／kg；依据IHC结果染色分析为脑缺血2．0h腹腔注射lOmg／kg；依据wB结果分析为脑缺血1．5h腹腔注射lOmg／kg；依据RT—PCR结果分析为脑缺血1．5h腹腔注射20mg／kg。结论：胡黄连苷II可以降低大鼠脑缺血损伤后MMI。9的表达，对

4、脑组织起到显著的保护作用。按治疗时问窗最大化和用药剂量最小化的原则，其最佳治疗时间窗和剂量为脑缺血1．5—2．0h腹腔注射lO20mg／kg。硕士研究生逢芳芳(中西医结合临床)指导教师张美增教授关键词：胡黄连苷m脑缺血；治疗剂量：时间窗；基质金属蛋白酶一9THEEFFECTOFPICROSIDEIIONEXPRESSIONOFMATRIXMETALLOPROTEINASE一9AFTERCEREBRALISCHEMICINJURYINRATSAbstractObjective：ToexploretheeffectofpicrosideIIonthe

5、expressionofmatrixmetalloproteinase一9(MMP一9)andoptimizethetherapeuticdoseandtimewindowaftercerebralischemicinjuryinrats．Methods：Atotalof174Wistarratswererandomlydividedintocerebralischemiagroup(modelgroup)(n=5x3)，controlgroup(n55×3)andtreatmentgroupwithpicrosideII(n=16x3x3)．T

6、heforebrainischemiamodelswereestablishedbybilateralconllTlOncarotidarteryocclusion(BCCAO)methods．Andtheratsintreatmentgroupwererandomlygroupedaccordingtoorthogonalexperimentaldesignof[L16(43)]andinjectedintraperitoneallywithpicrosideIIaccordingtothecorrespondingdosesdesignedi

7、ntheorthogonallayout．Themorphologyofnervecellandultrastructureofbraintissuewereobservedbyhaematoxylineosin(HE)stainingandtransmissionelectronmicroscopy(TEM)respectively．TheexpressionofMMP一9proteinwasdeterminedbyiIIlml】Ilohistochemical(IHC)stainingandWesternblotting(Ⅵ倡)．Theexp

8、ressionofMMP．．9mRNAwasdetectedbyreversetranscriptionpolymerasechainr