肝癌患者手术治疗前后cd4+cd25+tregs的变化及意义

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1、河北医科大学硕士学位论文肝癌患者手术治疗前后CD4+CD25+Tregs的变化及意义姓名：刘昭明申请学位级别：硕士专业：外科学指导教师：邢宏利201203中文摘要肝癌患者手术治疗前后CD4+CD25+Tregs的变化及意义摘要目的：观察肝癌患者手术治疗前后CD4+CD25+Tregs的变化。探讨手术治疗与患者免疫之间的关联性及意义。方法：收集2010年12月．2011年12月在衡水市哈励逊医院住院的肝细胞肝癌患者，男15例，女5例；正常对照组20例，来自衡水市哈励逊健康体检者。入组标准：l、肿瘤

2、单发<5cm，或病灶小于3个，每个病灶均<3cm。应用全自动生化分析仪检测血清—岍水平；酶联免疫法检测HBV血清学标志物：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb；定量PCR分析检测HBVDNA载量。并检测抗．HAV、抗．HCV、抗．HDV、抗．HEV、抗．HIV，以除外其它嗜肝病毒及HIV感染。外周血CD4+CD25+Tregs频率的测定：取外周肝素抗凝血，应用CD4、CD25免疫荧光抗体染色，红细胞裂．解液溶解红细胞，完全溶血后加0．02M磷酸盐缓冲液洗涤，应用加多聚甲醛．

3、磷酸盐缓冲液固定，重新悬浮细胞，上流式细胞仪检测，淋巴细胞射门，分析CD4+T细胞中CD4+CD25+T细胞的百分比。应用SPSS17．0统计软件对实验数据进行分析，所有数据采用均数4-标准差表示，组间比较采用单因素方差分析。以P<0．05为差异有统计学意义。结果：Treg细胞在肝癌患者手术前后数量变化CD4+CD25+T细胞在肝癌患者中所占Lt',侈tJ(10．45士3．23)％较正常对照组(2．36士0．89)％明显升高(P

4、统计学意义。术后2周(6．98士2．56m较术前明显下降(P

5、mberchangeofCD4+CD25+RegulatoryTCellafterOperationinHepatocarcinomaPatientstherapyABSTRACTObjective：TodetectthenumberchangeofCD4+CD25+TcellafteroperationanddiscusstheeffectofoperationonimmuneresponseofpatientswimHCC．Methods：20HCCchronichepatitisBpati

6、entswhichincluded15menand5womeninharisonHospitalfromDecember2010toDecember201wereenrolledinthisstudy．And20healthpeoplewasenrolledfromharisonHospitalHealthycheck-upcenter．Serum随弋WasmeasuredusinganOlympusAU2700auto—biochemicalanalyzer．HBVmarkers：HBsAg、

7、皿sAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，anti—HAV,anti-HCV,anti—HDV,anti-HEVandanti—HIVweredetectedbycommercialenzymeimmunoassaykitsrespectively．Peripheralheparinizedbloodsampleswerecollectedfromalltheenrolledindividuals．ForstainingofCD4+CD25十Tregs，FITC—anti-CD4andPE-

8、anti—CD25wereused．Afteralltheredbloodcellsweredissolved，0．02Mphosphatebuffersaline(PBS)WaSusedtowashthebloodsamples，thentheremainingcellswerefixedinparaformaldehyde—PBSandthefrequencyofCD4十CD25十Tcellsweredetectedbyflowcytometricanalysis，gatedfromIymp