灭多威诱导mdec-07114细胞凋亡的实验研究

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1、遵义医学院硕士学位论文灭多威诱导MDEC--07114细胞凋亡的实验研究姓名：赵丹申请学位级别：硕士专业：免疫学指导教师：贺莉芳201205遵义医学院硕士学位论文灭多威诱导MDEC．07114细胞凋亡的实验研究灭多威诱导MDEC-07114细胞凋亡的实验研究摘要目的：利用灭多威作用于家蝇胚胎细胞系(MDEC-07114)，探讨灭多威诱导MDEC一07114细胞凋亡及机制。方法：1、实验分组：不同浓度灭多威组(Img／ml组、2mg／ml组、4mg／ml组、8mg／ml组)，同时设正常组、1％丙酮组；2、HE染色法观察MDEC-07114

2、细胞凋亡形态，并测定细胞凋亡指数；3、TUNEL检测MDEC-07114细胞凋亡；4、透射电镜观察不同浓度灭多威作用后MDEC-07114细胞的超微结构变化；5、罗丹明标记处理MDEC-07114细胞，流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化。结果：1、不同浓度灭多威作用于MDEC一07114后，从2mg／ml组开始见典型凋亡细胞，细胞凋亡指数增加，且随浓度的递增而逐渐升高；2、TUNEL检测：2mg／ml组出现明显的绿色荧光，4mg／ml组有所增加，8mg／ml荧光最强；3、透射电镜观察：lmg／ml组开始出现核染色质浓缩、边集。从2mg

3、／ml组开始出现典型凋亡细胞形态，有大量的细胞核染色质浓缩、边集，胞浆内出现空泡，有线粒体肿胀、空化；4、流式细胞仪检测：2mg／ml灭多威作用于细胞后1h，荧光强度开始减弱，荧光峰左移，线粒体膜电位下降，随着药物作用时间的延长，线粒体膜电位逐渐下降，且呈时间依赖性。结论：1、灭多威可诱导MDEC-07114细胞凋亡；2、灭多威诱导MDEC一07114细胞凋亡过程中，可能有线粒体途径参与。关键词：灭多威；家蝇胚胎细胞系；凋亡；线粒体遵义医学院硕士学位论文灭多威诱导MDEC．07114细胞凋亡的实验研究Experimentalstudyo

4、ntheApoptosisofMDEC·-07114CellinducedbyMethomylAbstractObjective：ToexploretheapoptosisandmechanismofMuscadomesticaembryoniccellline(MDEC-0714)inducedbyMethomyl．Methods：1．Experimentalgroups：thedifferentconcentrationsofMethomylgroups(1mg／mlgroup，2mg／mlgroup，4mg／mlgroup，8mg

5、／mlgroup)、normalgroup、1％acetonegroup；2．Themorphologyofapoptosiscellswasobservedbyhematoxylin—eosinstainings，andtheapoptosisindex(AI)wasmeasured．3．TheapoptosisofMDEC-0714cellwasdetectedbyTUNEL．4．Theultra-structurechangesofMDEC一07114wasobservedbytransmissionelectronmicrosc

6、opy．5．Rhodamine-labeledMDEC一0714cells，effectofMethomylonmitochondrialmembranepotentialweredetectedbyflowcytometry．ResuR：1．Fromthe2mg／mlgroupsofMethomyl，thetypicalapoptoticcellbegantoappear．Moreover,withtheincreaseoftheconcentration，theapoptosisindex(AI)Wasgraduallyincrea

7、sed．2．TUNELassay：atthe2mg／mlgroups，MDEC一0714cellsappearedthevisiblegreenfluorescence．Thegreenfluorescenceincellswasenhancedatthe4mg／mlgroups．Itwasthestrongestatthe8mg／mlgroups．3．Transmissionelectronmicroscopyobservations：Thecellwasobservednuclearchromatincondensationandm

8、arginationatlmg／mlgroup．Fromthe2mg／mlgroup，apoptoticcellsincreasedwiththeincreaseoftheconcentration．Vac