大鼠视网膜兴奋损伤中hsp70与tnf-α表达的相关性研究

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1、青岛大学硕士学位论文大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70与TNF--α表达的相关性研究姓名：董丽娟申请学位级别：硕士专业：眼科学指导教师：王大博20120522大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70与TNF—Q表达的相关性研究摘要目的探讨大鼠视网膜兴奋损伤中HSP70与TNF-a表达的相关变化。方法健康成年清洁级Wistar大鼠50只随机分为三组，正常对照组(5只)、阳性对照组即NMDA玻璃体腔注射组(20只)、实验组即NMDA玻璃体腔注射组+硫酸锌腹腔注射组(25只)。实验组腹腔注射硫酸锌(24．6mg／Kg)，10h后随即处死5只。14

2、h后实验组和阳性对照组均做单眼的玻璃体腔注射NMDA(2Il180mmol／1)，并做好标记。NMDA注射后2h，8h，16h，24h，实验组和阳性组各组均随机处死5只大鼠。正常对照组不做任何处理，可以于任何时间点处死。HE染色光镜下观察各组视网膜组织的形态学变化，实时定量RT—PCR方法观察视网膜TNF-amRNA和HSP70mRNA表达的变化。结果1．HE染色：正常对照组大鼠视网膜组织结构层次清楚，染色均匀，细胞形态规则。阳性对照组造模后2h，神经节细胞开始水肿；造模后8h，神经节细胞水肿最严重，其内可见空泡，视网膜增厚；

3、造模后16h，神经节细胞水肿较前减轻，排列疏松，形态不规则，可见核固缩，数量减少；造模后24h，神经节细胞数目减少，排列紊乱，核固缩明显，神经纤维层、神经节细胞层变薄。各时间点实验组与阳性对照组相比，视网膜的厚度较厚，存活的视网膜神经节细胞的数量较多，损伤均轻于阳性对照组。2．荧光定量RT-PCR：正常对照组大鼠视网膜未见TNF-QmRNA表达，可见HSP70微量表达。阳性对照组中NMDA注射后2h，TNF—amRNA水平较正常对照组上调(P

4、达量降低，但仍高于对照组(P

5、，较阳性对照组下降(P<0．05)，注射后8h，TNF—amRNA水平达高峰(P(O．05)，较阳性对照组下降(P<0．05)，注射后16h表达量降低，但仍高于对照组(P(O．05)，较阳性对照组下降(P<0．05)，注射后24h，TNF—QmRNA表达量与16h无差别(p)O．05)，较阳性对照组下降(P(O．05)，较正常对照组增多(P<0．05)；硫酸锌注射后10hHSP70mRNA水平较正常对照组上调(P<0．05)，NMDA注射后2h，HSP70mRNA水平明显上调(P(O．05)，较阳性对照组增加(P<0．05)，

6、注射后8h，HSP70mRNA水平达高峰，与2h的无差别(p>0．05)，较阳性对照组增加(P0．05)，较阳性对照组增加(P<0．05)，注射后24h，HSP70mRNA水平下降，较阳性对照组增加(P

7、克蛋白70；肿瘤坏死因子QThestudyontherelationshipbetweenHSP70andTNF．aonretinalexcitotoxicityin．iuryinrat．sAbstractObjectiveTodiscussthecorrelativechangebetweenHSP70andTNF—aonretinalexcitotoxicityinjuryinrats．Methods50Wistarratswererandomlydividedintothreegroups，normalcontrolgr

8、oupincluding6rats，thepositivecontrolgroupincluding20ratswithintravitrealinjectionwithNMDAandtheexperimentalgroupincluding25ratswithintrape