乳化异氟醚对成年大鼠术后认知功能的影响

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时间:2019-03-01

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1、遵义医学院硕士学位论文乳化异氟醚对成年大鼠术后认知功能的影响姓名:樊睿申请学位级别:硕士专业:麻醉学指导教师:朱昭琼20120411遵义医学院硕士学位论文乳化异氟醚对成年大鼠术后认知功能的影响研究生樊睿导师朱昭琼摘要目的:通过Moms水迷宫实验,观察成年大鼠单次静脉注射乳化异氟醚(emulsifledisoflurane,E1)麻醉前后行为学的变化;ELISA法测定大鼠血浆S100的含量及免疫组织化学法测定大鼠大脑海马AB、tau蛋白的表达。探讨新型麻醉药EI对大鼠学习记忆功能的影响,以及术后认知功能障碍的发生可能机理,为EI安全应用于临床提供实验依据。方法:成年雄性SD大鼠(N=72),随

2、机分为六组:空白对照组(C组n-12)、阳性对照组(30%脂肪乳组,E组,n=12)、8%乳化异氟醚组(EI组,又分为四个亚组,即EI麻醉后2h、1d、7d、14d组,每组n=12)。麻醉前所有大鼠进行Moms水迷宫定位航行适应性训练实验5d,建立学习记忆模型。记录大鼠从入水到爬上平台所需时间和路程,即逃避潜伏期(s)和总路程(cm),作为大鼠定位航行实验的评价指标。麻醉前第6d行空间搜索实验,为观察大鼠记忆巩固情况,记录大鼠120s内在平台象限停留的时间(s);大鼠在平台象限游泳路程占游泳总路程百分比(%);120s内大鼠的游泳平均速度(cm/s)和经过平台次数(次数/120s),作为大鼠

3、空间搜索能力测试的评价指标。适应性训练结束后,C组不进行任何药物干预,E组给予30%脂肪乳(O.15ml/1009)鼠尾静脉注射后2h与C组一起再次行水迷宫实验;EI组给予8%乳化异氟醚(O.15ml/lOOg)鼠尾静脉注射后,分别于麻醉苏醒后2h、1d、7d、14d再次行水迷宫实验,观察指标同前。各组大鼠水迷宫实验完成后在各时间点以1%戊巴比妥钠(4mg/1009)腹腔注射麻醉后,取眼眶血2—4ml置于肝素管内,6℃下3000r/min离心15min后取血浆,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血浆S100含量。开胸,以4%多聚甲醛经主动脉行脑灌注,断头,取脑组织,石蜡包埋,切片,行免疫

4、组化染色测定海马AB和tau蛋白的表达。结果:1、水迷宫实验结果显示:(1)逃避潜伏期:注射EI后2h组为(15.5+5.3)S,C、E组分别为(8.8-4-6.1,9.34-2.8)S,注射EI后2h组明显长于c、E组(尸O.05);(2)总路程:注射EI后2h组为(386.8+127.2)cm,C、E组分别为(234.8+118.4,291.6士89.3)cm,EI注射后2h组明显长于C

5、、E组(P0.05);(5)游泳速度:各组

6、组间比较差异无统计学意义(P>O.05);(6)经过平台次数:各组组间比较差异无统计学意义(尸>0.05)。2、ELISA检测结果显示:注射EI后14d组血浆$100含量为(38.5+10.5)pg/ml,C、E组分别为(133.6+--24.2,130.3士89.4)pg/ml,EI后2h、1d、7d组分别为(199.1士72-3,116.2+29.5,121.1士41.2)p#ml,EI后14d组低于C、E组,EI后2h、1d、7d组(氏O.05),EI后2h组高于C、E组,但差异无统计学意义(D-O.05)。3、免疫组化染色结果显示:(1)AS结果:C、E组,EI后2h、1d、7d、1

7、4d组大鼠大脑海马中CAl区AD阳性反应平均光密度值分别为(O.157+-0.060,0.210+-0.087,0.182±0.080,0.133±O.056,0.061±0.021,O.053±0.011),C、E组,EI后2h、1d、7d、14d组大鼠大脑海马中CA3区Ap阳性反应平均光密度值分别为(0.175±0.026,0.159±0.097,0.187±0.074,0.140±0.058,0.072

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