异氟醚对血管性痴呆大鼠认知功能影响的实验研究

异氟醚对血管性痴呆大鼠认知功能影响的实验研究

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1、异氟醚对血管性痴呆大鼠认知功能影响的实验研究上海交通大学附属瑞金医院麻醉科200025陶国荣薛庆生任瑜于布为中文摘要目的本实验旨在考察异氟醚对血管性痴呆(VD)大鼠认知功能的影响,同时从海马α7nAChR表达水平考察异氟醚作用的可能机制。方法永久结扎SD大鼠双侧颈总动脉1个月构建VD模型,并设对照(Sham)组。将VD组(38只)及Sham组(19只)大鼠分成6组,分别吸入异氟醚或氧气。第1组:Sham+氧气组,n=10,每日吸入纯氧1小时,连续吸5天;第2组:Sham+异氟醚组,n=9,每日吸入2

2、%异氟醚1小时,连续吸5天;第3组:VD+氧气组,n=9,每日吸入纯氧1小时,连续吸5天;第4组单次吸入异氟醚组:VD+异氟醚组,n=9,第5日吸入2%异氟醚1小时;第5组每日吸入异氟醚组:VD+异氟醚组,n=10,每日吸入1.4%异氟醚1小时,连续吸5天;第6组每日吸入高浓度异氟醚组:VD+异氟醚组,n=10,每日吸入2%异氟醚1小时,连续吸5天。处理结束后再利用MORRIS水迷宫观察吸入异氟醚对大鼠认知功能的影响;然后行常规病理检测观察吸入异氟醚对海马区病理形态的影响,并用免疫组化、Wester

3、nblot和real-timePCR检测海马区α7nAChR的表达。结果水迷宫实验发现异氟醚抑制Sham组和VD组大鼠空间认知功能;常规病理(HE染色、焦蓝紫染色和快兰染色)显示2、3、4、5、6组大鼠海马区受损,其中4、5、6组损伤较重,表现为海马区神经细胞明显肿胀、出现核固缩、胶质细胞增生;第4、5、6组大鼠海马区α7nAChR的蛋白水平明显低于第1、2、3组;第4、5、6组大鼠海马区α7nAChR的mRNA水平显著高于第1、3组。在所有6组中,第5组大鼠的认知功能及病理形态损伤最重,其α7nA

4、ChR的蛋白水平最低、mRNA水平最高。结论异氟醚吸入可加重VD大鼠认知功能的降低,该作用可能与48异氟醚抑制VD大鼠海马区α7nAChR的表达有关,这种作用可能与异氟醚的浓度及剂量有关,。关键词术后认知功能障碍;血管性痴呆;异氟醚;MORRIS水迷宫;神经元烟碱受体;免疫组化;实时定量PCR;蛋白质印迹ABSTRACTObjectiveToinvestigatetheeffectsofisofluraneoncognitionofvasculardementia(VD)ratsandtheexpr

5、essionofα7nAChRintheirhippocampus.MethodsTheVDmodelwasestablishedbythemethodofpermanentocclusionofthebilateralcommoncarotidarteries(2VO)andsettheshamgroupascontrol.Afteronemonth,theVDandtheshamratsweredividedinto6groupsbydifferentconcentrationsofisoflu

6、raneandoxygeninhalation.Group1(n=10):Sham+oxygen,inhaledpureoxygen1hperdayfor5days;Group2(n=9):Sham+isoflurane,inhaled2%isoflurane1hperdayfor5days;Group3(n=9):VD+oxygen,inhaledpureoxygen1hperdayfor5days;Group4(n=9):VD+isoflurane,inhaled2%isofluranefor1

7、honlyforoneday;Group5(n=10):VD+isoflurane,inhaled1.4%isoflurane1hperdayfor5days;Group6(n=10):VD+isoflurane,inhaled2%isoflurane1hperdayfor5days.TheinfluencedofisofluraneonthecognitivefunctionofVDandshamratswerealsoevaluatedbytheMORRISwatermazetestandpat

8、homorphologicalexamination,theproteinandmRNAlevelsofα7nAChRintheratshippocampusweredetectedbythemethodsofimmunocytochemistry,westernblot,andreal-timePCR,respectively.ResultsAfteronemonthof2VO,thespatialcognitionsofVDratswere48markedlyde

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