在高植物蛋白饲料中添加胆固醇、牛磺酸和大豆皂甙对大菱鲆生长性能和胆固醇代谢的影响

在高植物蛋白饲料中添加胆固醇、牛磺酸和大豆皂甙对大菱鲆生长性能和胆固醇代谢的影响

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时间:2019-03-01

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1、中国海洋大学博士学位论文在高植物蛋白饲料中添加胆固醇、牛磺酸和大豆皂甙对大菱鲆生长性能和胆固醇代谢的影响姓名:贠彪申请学位级别:博士专业:水产养殖指导教师:麦康森201206在高植物蛋白饲料中添加胆固醇、牛磺酸和大三乏皂甙对大菱鲆生长性能和胆固醇代谢的影响摘要以我国重要海水肉食性养殖鱼类大菱鲆(ScophthalmusmacimusL.)为实验对象,在室内流水养殖系统中进行摄食生长实验,研究高植物冒}白饲料中添加胆固醇、牛磺酸和大豆皂甙以及限饲水平对大菱鲆生长性能和胆国醇代谢的影响。在此基础上探讨植物蛋白降低鱼类血浆胆固醇的机制。本文的石f究内容和主要研究结果如下:1、高植物蛋白饲料中添

2、加胆固醇对大菱鲆幼鱼摄食、生长和且i固醇代谢的影响用添加胆固醇的高植物蛋白饲料饲喂大菱鲆(Scophthalmu7maximusL.)幼鱼9周,研究其对大菱鲆摄食、生长和胆固醇代谢的影响。实g≥设计了5组等氮等脂饲料,以含鱼粉58%的饲料作为基础饲料(FM),而其它4I且饲料均含14.5%的鱼粉、42.0%豆粕和18.5%谷朊粉,在这4组饲料中分别补充0.0%(C.0.O%)、0.5%(C.0.5%)、1.O%(C.1.0%)和1.5%(C.1.5%)的胆固l享,其实测值分别为0.30%、0.77%、1.25%开tI1.78%,而基础饲料中胆固醇检测一苴为0.63%。结果表明,摄食饲料F

3、M的大菱鲆增重率和饲料效率均显著高于其它饲料组(氏O.05)。与C.0.0%组相比,摄食饲料C.1.0%组显著提高一’大菱鲆幼鱼的摄食率、增重率和血浆及肝脏胆固醇水平(氏O.05)。与C-1.O‘名组相比,摄食饲料C.1.5%组显著抑制了实验鱼的增重率和摄食率(P<0.05)。当饲料中胆固醇含量为1.25%(C.1.0%)时,其全鱼脂肪含量最高,且显亳-高于其它处理组(P<0.05)。饲料中胆固醇含量与血浆中总胆固醇、游离胆固i享、胆固醇酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量、肝脏中总胆司醇、胆固醇酯的含量及粪便中总胆固醇的含量呈显著相关关系,相关系数均大于二0.74。饲料中含

4、有0.30%的胆固醇(c.0.O%),其粪便总胆汁酸含量和肝脏胆固醇7A羟化酶的活性在所有处理组中最低。该研究结果表明,高植物蛋白饲料扣含有1.25%的胆固醇有利于大菱鲆幼鱼的生长,且对其生理状态无不良影响。V2、大菱鲆HMG。CoAr基因的克隆、序列分析以及胆固醇添加到高植物蛋白饲料中对肝脏HMG-CoAr基因mRNA表达量的影响以大菱鲆(ScophthalmusmaximusL.)为实验材料,利用同源克隆技术和RACE技术从大菱鲆肝脏中成功扩增出3.羟基.3.甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3一hydroxy-3-methylglutaryl—CoenzymeAreductase,HMG

5、-CoAr)cDNA的全序列。HMG.CoAr基因cDNA全长序列为3048bp(GenbankNo:JN542428),其中包括一个有2664bp的开放阅读框且编码887个氨基酸,预测分子量约为96.52kDa,理论等电点为6.44。BLAST分析显示大菱鲆HMG.CoAr基因与其它已知脊椎动物具有高度同源性,且N.端和C。端高度保守,仅连接N.端和C.端的中间疏水部分变异较大。序列分析指出HMG.CoAr基因在N.端氨基酸部分包括5个主要的跨膜域。实时定量PCR技术检测了全鱼粉组(FM)、高植物蛋白组(C.0.O%)和高植物蛋白组基础饲料中添加1.O%的胆固醇(C.1.O%)对大菱鲆

6、肝脏HMG.CoAr基因mRNA表达量的影响。结果表明,与摄食全鱼粉组相比(DietFM),摄食高植物蛋白饲料(C.0.0%)能显著上调大菱鲆肝脏HMG.CoAr基因mRNA的表达(P

7、牛磺酸研究其对大菱鲆(ScophthalmusmaximusL.)幼鱼生长性能和胆固醇代谢的影响。实验基础饲料(对照组)包括14.5%的鱼粉和50%的粗蛋白,在基础饲料中分别添加1.0%牛磺酸、1.O%胆固醇及1.0%胆固醇和1.0%牛磺酸的混合物(各组饲料分别命名为C.1.0%、T.1.0%和TC),配制成等氮等脂的实验饲料。实验结果表明摄食饲料C.1.0%、T-1.0%和TC的大菱鲆增重率显著高于对照组。其中摄食饲料TC的大菱鲆

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