骨髓间充质干细胞增殖及对肺损伤修复的研究

《骨髓间充质干细胞增殖及对肺损伤修复的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、骨髓问充质干细胞增殖及对肺损伤修复的研究计：学位论文：46页表格：6个衣怡：b7r插图：19幅王磊指导教师：闻庆平教授申请学位级别：硕士学位论文提交日期：2012年4月学位授予单位：大连医科大学专业名称：麻醉学论文答辩日期：2012年5月学位授予日期：2012年6月评阅人：答辩委员会主席：独创性声明＼㈣本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了

2、明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：遂!她年￡月盖日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(二)第一部分BMSCs培养、鉴定及对增殖的影响材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11(三)第二部分：增殖的BMSCs对ALI的治疗作用材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16结果⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯29(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34(一)综述正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4O四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46骨髓间充质干细胞增殖及对肺损伤修复的研究硕士生姓名：指导教师：指导小组：专业名称：王磊闻庆平教授麻醉学摘要目的：本研究以SD大鼠为动物模型，研究大鼠BMSC

4、s体外分离培养、鉴定和增殖，评价不同浓度的LPS对BMSCs增殖能力的影响：并探讨通过增殖的BMSCs对ALl修复的可行性。方法：1．原代BMSCs的分离培养、诱导分化鉴定、流式细胞鉴定，并观察不同代的BMSCs的生长状况。给予不同浓度的LPS与BMSCs共培养，利用MTT法判断BMSCs增殖时LPS的最适浓度。2．随机从28只雌性大鼠中取24只，经腹腔注入O．5ml浓度为5mg／kg的LPS建立ALI，造模0．5h后，将其随机分成3组：治疗组A(8只，经尾静脉注入浓度为1x104／ml的BMSCs，体积为O．5m1)，治疗组B(8只，经尾静脉注入预先用浓度为0．0199／mlLPS共培

5、养的BMSCs1×104／ml，体积为O．5m1)，损伤组(8只，经尾静脉注入0．5mlPBS)，对照组(4只，经尾静脉注入等量的PBSlml)。24h后检测各组大鼠的血气指标、肺湿干比、病理变化、及支气管肺泡灌洗液中TNF．Q和IL．10的变化。结果：1．分离培养的BMSCs呈现长梭形，紧密排列似漩涡状。经诱导液诱导后，能分化成脂肪细胞和成骨细胞。流式鉴定表面抗原CD29和CD90表达阳性，CD45和CDl1表达阴性，符合骨髓间充质干细胞特性。MTT法显示第3代和第5代相比第7代的BMSCs增殖较旺盛。浓度为0．01gg／ml的LPS对BMSCs增殖作用最显著。2．成功造模24h后，损

6、伤组明显出现低氧、二氧化碳潴留和酸中毒，肺湿干比值较正常高，病理切片示肺泡间隔断裂增宽，组织疏松，并有炎性细胞侵润。BALF中的TNF一0【较对照组明显增高、IL．10较对照组明显降低。治疗组血气分析指标趋向正常，肺湿干比趋向正常，病理切片肺泡结构相对均匀完整，肺泡间隔增宽不明显，炎性细胞侵润明显减少，BALF中的TNF—Q较损伤组明显降低、IL．10较损伤组明显增高，而且治疗组B比治疗组A效果佳。结论：1．BMSCs经诱导可分化成脂肪细胞、成骨细胞。2．本实验用浓度为0．0199／ml的LPS刺激BMSCs后其增殖能力增强。3．本实验经腹腔注入浓度5mg／kg的LPS可建立ALI模型。

7、4．注入增殖的BMSCs后可改善病理学变化，有助于促炎因子TNF-0【的降低和抗炎因子IL．10的增高。关键词：骨髓间充质干细胞增殖脂多糖肺损伤2Studyontheproliferationofbonemarrow—derivedmesenchymalstemcellsandtheirtherapeuticeffectstolunginjuryMasterdegreecandidate：WangLeiSupervisor：Prof