新辅助化疗后口腔颌面—头颈部鳞癌组织中omihtra2的表达及意义

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为申报的专利等知识产权均归河研究生签名溺蕊舐导师签章河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人己经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责

2、自负。研究生签名：霸泛砾日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯】英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5研究论文新辅助化疗后口腔颌面．头颈部鳞癌组织中Omi／HtrA2的表达及意义—、￡·—．L日}I舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．3O结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33综述Omi／HtrA2及其与恶性肿瘤关系中的研究进展⋯⋯⋯．．37致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49中文摘要新辅助化疗后口腔颌面．头颈部鳞癌组织中Omi／HtrA2的表达及意义摘要目的：头颈癌是世界范围内第六大常见癌症11,2]，其中，鳞状细胞癌是最常见的类型。新辅助化疗是目前治疗头颈鳞癌的主要方

4、法之一。新辅助化疗首先由Frei在1982年提出，1989年由Skarin就其临床效果做了初步报道，随后人们将其应用于头颈鳞癌的治疗，并一直探索如何使其提高头颈鳞癌的控制率及生存率。随着对肿瘤形成机制的深入研究，人们逐渐认识到肿瘤细胞对细胞凋亡的敏感性是决定化疗效果的关键因素，人们对OmVHtrA2的发现、研究及深入，越来越多地研究指向Omi／HtrA2能够诱导细胞凋亡，并可以加强细胞对化疗药物的敏感性，同时证实通过对Omi／HtrA2的干预可能成功地阻止肿瘤的发展。本实验通过应用RT-PCR及免疫组化的方法检测经新辅助

5、化疗药物——奈达铂干预前后头颈鳞癌组织中Omi／HtrA2的表达情况，从而为新辅助化疗的应用提供理论依据，有望为如何提高头颈鳞癌控制率及生存率的研究提供新思路。方法：收集我院2012年03月至2013年08月间头颈鳞癌患者标本45例。所有患者手术前均局部取检经病理证实，并应用奈达铂术前诱导化疗。标本均为术后立即取材，一式两份，一份固定于4％甲醛中，一份置．80℃低温冰箱中，编号保存备用。1RT．PCR检测奈达铂干预前后Omi／HtrA2基因在头颈鳞癌组织、鳞癌癌旁组织中的表达行组织研磨，应用Trizol提取总RNA，用琼

6、脂糖凝胶电泳鉴定提取出的总RNA，用紫外分光光度计对其进行定量。按照逆转录试剂盒说明操作将提取的RNA合成eDNA第1链，而后扩增目的基因，以B．acton基因作为扩增产物的内参，用凝胶成像系统观察结果，行图像采集。2免疫组织化学检测奈达铂干预前后Omi／HtrA2在头颈鳞癌组织、鳞癌癌旁组织的表达将各组包埋组织的蜡块，脱蜡至水，按Maxvision2／HRP试剂盒操作说明操作，电镜下观察。中文摘要3结果判断3．1半定量分析Omi／HtrA2基因的表达情况将目的产物和I]-actin的条带行灰度扫描，并运用Quantit

7、yOne软件定量分析结果。3．2免疫组化分析Om棚trA2的表达情况Omi／HtrA2染色阳性表达为胞浆中找到棕黄色颗粒，用免疫组化半定量法评价结果，进行病理分级、分组，并记录。4统计学方法SPSSl3．0统计软件包分析数据，采用重复测量的方差分析、船检验和SNK两两比较的方法进行检验，P<0．05计为差异有统计学意义。结果：1免疫组化检测Omi／HtrA2在各组中的表达情况。免疫组化检测用药前头颈鳞癌组、癌旁组织组中Omi／HtrA2阳性表达率分别为64．4％(29／45)、13．3％(6／45)，两组问经卡方检验差异

8、有统计学意义(尸