宁波北仑地区急性腹泻患者副溶血弧菌表型及分子特征研究

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1、万方数据宁波北仑地区急性腹泻患者副溶血弧菌表型及分子特征研究⑧论文作者签名:指导教师签名:论文评阅人l:王贤军教授杭州市第一人民医院评阅人2:评阅人3:评阅人4:评阅人5:答辩委员会主席:委员1:委员2:委员3:委员4:委员5:答辩日期:2014年5月22日万方数据

2、

3、IIIIIIIIlUIIIIIIUlY2743749浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得逝望盘堂或其他教育机构的学位或证

4、书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:;和f靠·签字日期:钞忡年,月1El学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解逝’江盘堂有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权逝望盘堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:昂瑰导师签名:签字日期:伽l平年,月1日签字日期:妒,p年歹月卅日万方数据浙江大学硕士学

5、位论文致谢在浙江大学医学院攻读同等学力硕士学位期间,得到过许多人的帮助,谨向所有关心我的师长、同事、朋友和亲人致以衷心的感谢。衷心感谢我的导师陈瑜教授接受我并给我一个宽松又富有挑战性的学习和科研工作平台,并给予很多无私的帮助。同时老师的认真锐意进取的执着精神为学生树立了榜样。感谢陈晓老师在课题研究和论文写作过程中,一直都给予我精心的指导和帮助,帮助我解决了许多学习科研难题。感谢同门师兄韩东升硕士在实验操作和论文写作中指导我,并给予我很多无私的帮助,你刻苦认真的学>--j态度是我学>--j的榜样。感谢科室领导周方满主任给予的支持和帮助,感谢同事、朋友的

6、关心和热情的帮助。特别感谢家人自始自终对我的无私关爱,在工作、生活和学>-j上对我的支持,成长的路上都是你们在背后默默地付出,绝不辜负你们的殷切期望。最后,衷心感谢参加论文评审和答辩的各位专家学者,并致以崇高的敬意。二零一四年三月万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要宁波北仑地区急性腹泻患者副溶血弧菌表型及分子特征研究浙江大学医学院临床检验诊断学硕士研究生导师谢红意陈瑜教授中文摘要目的:副溶血弧菌(Vibrioparahaemolyticus,VP)是一种革兰阴性嗜盐性弧菌,广泛存在于海水和海产品中。1950年在日本副溶血弧菌首次发现并被认为是引起食物

7、中毒的重要致病茵,在我国,副溶血弧菌感染引发的暴发事件居微生物食源性疾病爆发的首位。浙江宁波位于我国东南沿海,海产品消费比较盛行,人们又喜欢食用生的或者未煮熟的海产品,因此副溶血弧菌是引起食物中毒最主要的病原菌。本课题通过收集宁波北仑区急性腹泻患者粪便标本,通过检测血清学凝集试验,可以知道宁波北仑区溶血弧菌血清型构成谱;通过毒力基因检测及分子分型分析,可以为副溶血弧菌感染的防控提供分子流行病学依据,这为开展副溶血弧菌的持续监测研究提供依据,并为进一步的研究工作奠定基础。方法:2012年4月至2012年10月,从北仑区人民医院采集急性腹泻患者的粪便标本

8、,用常规微生物检验程序对常见肠道致病菌进行分离培养及鉴定。对分离的副溶血弧菌菌株开展血清学凝集试验、利用PCR技术检测毒力基因检测及多位点序列分型(池ST)分析。II万方数据浙江大学硕士学位论文中文摘要结果:1.2012年4.10月共收集腹泻患者的粪便共962份,共分离出副溶血弧菌71株,分离率为7.4%(71/962),列细菌性病原第二位。感染病例男女性别比为1.73:1(45例:26例),年龄范围为16.61岁,其中主要集中在20.45岁(69.0%,49/71)。2.本次研究共有16种O、K血清型组合,其中03:K6型是最主要的血清型,共44株

9、,占62.0%;04:K8(5株,7.0%)、01:K56(3株,4.2%),另有3(4.2%)株未鉴定出O、K型别,归类于OUT:KUT型。3.利用PCR对71株副溶血弧菌进行tdh、trh、tlh毒力基因检测发现:所有副溶血弧菌砌基因均阳性,98.6%的菌株(70株)tdh基因阳性,仅3株为trh阳性。基因型表现为:砌+砌+trh一菌株67株,砌+砌十印办+菌株3株和砌+tdh—trh一菌株l株。通过对大流行群菌株遗传标志性基因的检测发现,宁波北仑区急性腹泻患者感染的副溶血弧菌主要是大流行菌株(tdh+,trh.和toxRS/new+),共47株

10、(66.2%);非大流行菌株共24株(33.8%)。36株大流行菌株携带orf8基因,占所有大流行菌株的76

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