宁波地区副溶血弧菌血清型与部分毒力基因的分布研究

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1、肇中农业大学2008麟硕士学位谂文时，细菌表达煞生鞭毛系统；当生活在菲黏性麴液体嚣重，缀蓊表达极生鞭鼍系统。遗传分析指出副溶血弧菌鞭毛基因系统复杂，周身鞭毛和极性鞭毛的基因系统不同，其结构和装配成分也不同(McCarteretal。。1993)。1．1-3生长与栖息环境副溶血弧菌为兼性厌氧蘸，藐够生长的pH秀毒。客。l1．0，生长最适母l隽7。6-9。0，是一种嗜盐菌(halophilic)，生长过程必须有Na+离子的存在(2％．1l％)，在3％．6％盐度中生长良好，生长澄凄范围薏5-48℃，4℃

2、进入活的棼霉培养状态(viablebutnonculturablestate)(寇运同等，2000)，最适温度为28．37℃，副溶血弧菌为嗜温菌，其致病多发生在夏季，在水湿25．32℃下容易流行。副溶血弧菌生存子海洋及河瑟环境，常出现予鱼、虾、贝类等海产动物的体表或肠道蠢，可弓l超鳙、石斑鱼、草虾、斑节虾、大黄鱼的疾病(毛芝娟等，2002)，是海水养殖动物的条件致病菌。1．1．4培养特性副溶血弧菌必须在有盐度豹情况下才能生长良好，在增殖培养时，可选择副溶盎弧菌增菌液或者是盐度3％的脑心浸液BHI(

3、Brain．k缎infusion)进行增殖培养。在分离鉴定时可选择碱性胆盐琼J]旨(TCBS)培养基，TCBS培养基是一种为弧菌(Vibfiospp)设计靛培养基，又被髂为弧菌选择培养基(Vibrioselectiveagar)。其中酶疆盐(bilesal0抑制革兰氏阳性菌的生长，使革兰氏阴性菌得以生长；利用蔗糖(sucrose)发酵的不霜，使培养基产生不同颜色得驻区分。除了霍剩新冁蘧≤Vibriohollisae)之豁熬其他弧菌都可以在TCBS上生长，副溶血弧菌在TCBS琼脂平板上形成蓝绿签状菌

4、落。l。l。5生纯特性副溶血弧菌的生化特性可以利用副溶血弧菌生化鉴定试剂盒进行，用API．20E系统辅髓蓥定，其主要生纯特性为嗜盐，在冤盐培养基土不生长，在3％．6％盐度巾生长良好；革兰氏阴性，弧状，极生单鞭鼍，氧化酶阳性，发酵型，精氨酸双水解酶、尿素酶为弱性，赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、淀粉酶、明胶酶、MR试验必熙性，柠檬酸盐、VP试验为阴性，吲哚为阳饿、不产生硫化氢，利用葡萄糖、甘露醇产酸，不利用肌醇、鼠李糖、蔗糖、蜜二糖、苦杏仁替，明胶酶阳性，见表1．1。2宁波地区剐溶血弧菌胤淌型和部分簿力

5、基因的分布研究表重．重副港斑弧菌的生纯特戆瓣Table1-IBiochemicalcharacteristicsofVibrloparahaemolyticus矮譬卯顼爨彬’Items革兰氏染色Gramstain-极生鞭毛polarflagellum+O／F试验O／FtestF熬生鞭毛rosetteflagellumTCBS生长TCBSagar·’Y葡萄糖产酸Glucose，acid+靛基质产生Indoleproduction4-麓萄耱产气Glucosegasproduction一氧化酶试验Oxi

6、daseproduction+乳糖Lactose-MR试验MRreaction÷蔗糖Sucrose—vP试验VPreaction．甘露糖Mannose+硫化氢产生H2Sproduction一纤维二糖Cellobiose-赖氨酸脱羧酶Lysinedeearboxylase÷麦芽糖Maltose+精氨酸双水解酶Argininedecarboxylase·甘露醇Mannitol+鸟氨酸聪羧酶Omithinedecarboxylase÷鼹醇Inositol-脲酶Urease-山梨醇Sorbitol-争半乳

7、糖蛰酶fl-Galactosidase一永榜苷Salicin*赡胶酶Gelatinase+柠檬酸盐Citrate+淀粉酶Amylase+硝酸盐还原Nitratereduction+脂肪f晦(Tween-80)Lipase—O／129敏感性(18鍪彩R卵磷脂酶(蛋黄)Lecithinase+O／129敏感性050I_tg)s过氧化氢酶Catalase÷G+C含量(t001％)45-47溶血性Haemolyticus13G+Ccontent(moI％)4℃生长4℃，growth·0％NaCl生长0％N

8、aCl，growth-15℃生长15℃，growth+3％NaCl生长3％NaCI，growth+28℃生长28℃。growth-i-6％NaCI生长6％NaCI，growth+3了℃生长37℃，growth4-8％NaCI生长8％NaCl，growth+42℃生长42℃，growth4-10％NaCl生长10％NaCl，growth+注；Y黄色；F发酵；表示溶蠢；S敏感；R不敏感；I’衰中t叮，袭示0％-10％的阳性，0％-10％positive：“∥表示90％-loo％阳性，9