乳酸链球菌素nisin前导肽酶nisp的结构与功能研究

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1、万方数据中图分类号:UDC:学校代码:10055密级:公开高触大謦博士学位论文乳酸链球菌素nisin前导肽酶NisP的结构与功能研究StructuralinsightintothenisinleaderpeptidaseNisP论文作者筮题注指导教师垡王塑塾援申请学位堡堂擅±培养单位生金型堂堂医学科专业生物丝堂皇佥王生塑堂研究方向结趁生物堂答辩委员会主席生童塞评阅人生童塞塍然垃塑洼南开大学研究生院二。一四年四月万方数据南开大学学位论文使用授权书根据《南开大学关于研究生学位论文收藏和利用管理办法》,我校

2、的博士、硕士学位获得者均须向南开大学提交本人的学位论文纸质本及相应电子版。本人完全了解南开大学有关研究生学位论文收藏和利用的管理规定。南开大学拥有在《著作权法》规定范围内的学位论文使用权,即:(1)学位获得者必须按规定提交学位论文(包括纸质印刷本及电子版),学校可以采用影印、缩印或其他复制手段保存研究生学位论文,并编入《南开大学博硕士学位论文全文数据库》;(2)为教学和科研目的,学校可以将公开的学位论文作为资料在图书馆等场所提供校内师生阅读,在校园网上提供论文目录检索、文摘以及论文全文浏览、下载等免费

3、信息服务;(3)根据教育部有关规定,南开大学向教育部指定单位提交公开的学位论文;(4)学位论文作者授权学校向中国科技信息研究所及其万方数据电子出版社和中国学术期刊(光盘)电子出版社提交规定范围的学位论文及其电子版并收入相应学位论文数据库,通过其相关网站对外进行信息服务。同时本人保留在其他媒体发表论文的权利。非公开学位论文,保密期限内不向外提交和提供服务,解密后提交和服务同公开论文。论文电子版提交至校图书馆网站。本人承诺:本人的学位论文是在南开大学学习期间创作完成的作品,并已通过论文答辩;提交的学位论文

4、电子版与纸质本论文的内容一致,如因不同造成不良后果由本人自负。本人同意遵守上述规定。本授权书签署一式两份,由研究生院和图书馆留存。作者暨授权人签字:筮题注2014年05月22Et南开大学研究生学位论文作者信息论文题目乳酸链球菌素nisin前导肽酶NisP的结构与功能研究姓名徐跃洋学号1120110314答辩日期2014年5月22日论文类别博士√学历硕士口硕士专业学位口高校教师口同等学力硕士口院/系/所生命科学学院专业生物化学与分子生物学联系电话l8722582365Emaililylyl986@163

5、.tom通信地址(邮编):南开大学生命科学学院新生物站A202(300071)备注:是否批准为非公开论文否注:本授权书适用我校授予的所有博士、硕士的学位论文。由作者填写(一式两份)签字后交校图书馆,非公开学位论文须附《南开大学研究生申请非公开学位论文审批表》。万方数据南开大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师指导下进行研究工作所取得的研究成果。除文中已经注明引用的内容外,本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的研究工

6、作做出贡献的其他个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。学位论文作者签名:盆送注2014年05月22日非公开学位论文标注说明(本页表中填写内容须打印)根据南开大学有关规定,非公开学位论文须经指导教师同意、作者本人申请和相关部门批准方能标注。未经批准的均为公开学位论文,公开学位论文本说明为空白。论文题目申请密级口限制(≤2年)口秘密(≤10年)口机密(≤20年)保密期限20年月日至20年月日审批表编号批准日期20年月日南开大学学位评定委员会办公室盖章(有效)注:限

7、制★2年(可少于2年):秘密★10年(可少于10年):机密★20年(可少于20年)万方数据摘要Nisin是一种由乳酸乳球菌产生分泌的抗菌多肽,其分子内部含有5个硫酯环,因而被称为羊毛硫抗生素。Nisin能够有效抑制多种革兰氏阳性细菌,同时由于其对哺乳动物及人类均无毒害作用,因而长期在世界范围内被广泛用作食品防腐剂。NisP属于丝氨酸蛋白酶中的枯草杆菌酶家族,其作为nisin的前导肽酶,通过切除nisin前体中的前导肽而在nisin的最终成熟中起重要作用。乳酸乳球菌LAC71中,nisP基因部分缺失后,

8、表达功能失活的NisP蛋白,导致携带有前导肽的未成熟nisin的产生。本文通过结构生物学手段,纯化并结晶了硒代NisP蛋白催化结构域部分,收集了其1.10A的衍射数据并解析了其高分辨率的晶体结构。文章首先将NisP与其同源蛋白结构进行了比较,表明与其他枯草杆菌酶家族成员有较高的同源性,均具有保守的催化三联体结构,利用活性位点的丝氨酸残基对蛋白质中的肽键进行亲核攻击而造成蛋白质的水解。通过对催化三联体中的His306和Ser512进行突变,证明这两个氨基酸

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