南极磷虾高值成分的提取与分离

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1、硕士学位论文南极磷虾高值成分的提取与分离Extractionandseparationofhigh—valuedcomponentsintheEuphausiasuperba学号：21118102完成日期：窒Q!垒生互旦大连理工史学DalianUniversityofTechnology大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他

2、己申请学位或其他用途使用过的成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。学位论文题目：鸯选叠蛏岛焦!盐盒笪搀盈量金岛作者签名：逢塞每日期：塑缍年—．垒月—止日大连理工大学硕士学位论文摘要南极磷虾(Euphausmsupe砌a)是一种生活在南极海域的甲壳类浮游动物。南极磷虾含有油脂、蛋白、虾青素和甲壳素等高值成分，具有很高的开发利用价值。然而，南极磷虾的高氟、砷及其它重金属元素含量是限制南极磷虾资源开发的关键因素。目前，南

3、极磷虾油脂、蛋白和甲壳素等高值成分的分离提取多采用有机溶剂提取、机械脱壳或酶解以及强酸强碱法。这些方法都是针对南极磷虾单一高值成分进行分离，不能实现同时分离多个成分，且操作繁琐，目标产物损失率高。同时，这些方法得到的产品中氟、砷及其它有害元素含量普遍较高。本文利用一种新型的多相盐析萃取体系，可同时分离提取南极磷虾油脂、蛋白和甲壳素等高值成分，再利用蛋白酶解法迸一步分离和利用南极磷虾蛋白质和甲壳素，同时大幅降低了南极磷虾油脂和蛋白等终产物中有害元素的含量。首先利用正己烷／乙醇(10：1，w／w)混合

4、溶剂在室温下直接提取冷冻南极磷虾油脂。接着利用柠檬酸钠／柠檬酸混合液．乙醇一正己烷多相盐析萃取体系进一步提取分离提油后残渣中的高值成分。通过实验确定最佳的提取分离条件为：多相盐析萃取体系组成为56．5％柠檬酸钠／柠檬酸混合液(柠檬酸钠／柠檬酸／水的质量比为9：l：20．5)(w／w)．18．5％乙醇(w／『w)-25％正己烷(w／w)，南极磷虾残渣的加入量为7．5％(w／w)，混合时间为120rain。该最优条件下，磷虾残渣中粗油脂的回收率为54．7土O．5％，固相蛋白的回收率为58．6士1．7％

5、，上相和中相的虾青素回收率分别为24．1士0．6％和16．6土0．6％。经过两次提取后，南极磷虾的油脂提取率达到95％。同时，经过多相盐析萃取后，上相的氟、砷及其它重金属含量大幅降低(51．3％)。将近70％的氟元素从磷虾残渣中脱离，进入下相；不同比例的砷及其它重金属元素进入中相和下相中，固相的重金属残留量为24．1．55．1％。其次，对混合溶剂提取与多相盐析萃取的南极磷虾油脂进行分析和比较。分别测定了这两种油脂的磷脂含量、酸值、游离脂肪酸含量、氟、砷以及其它重金属元素的含量，同时运用薄层层析和气

6、相色谱分析两种油脂的成分与脂肪酸组成。结果表明，这两种油脂存在一定的差异。实验还发现，南极磷虾油脂具有较强的抑制肿瘤细胞系生长的作用，混合溶剂提取的南极磷虾油脂对HL60、U937的IC50值分别为0．137m咖L和0．199m∥mL。利用硅胶柱分离南极磷虾油脂，结果发现一种极性介于游离脂肪酸和磷脂之间的II号组分是赋予南极磷虾油脂抗肿瘤活性的关键组分。最后采用蛋白酶解法对多相盐析后分离的固相进行酶解。经过单因素和正交实验，最终筛选出胰蛋白酶为最佳的蛋白酶，最佳工艺条件为：酶添加量2％，pH值8，

7、保温南极磷虾高值成分的提取与分离温度和时间分别为35℃和10h。在此最佳工艺条件下，固相残渣酶解的水解度和固体残渣减少量分别为44．9％和76．8％。关键词：南极磷虾；多相盐析萃取；油脂；蛋白酶解大连理工大学硕士学位论文Extractionandseparationofhigh—valuedcomponentsintheEuphausiasuperbaAbstractEuphausiasuperbaisaspeciesofcrustaceanfoundintheAntarcticwaters，‘a

8、ndhasbeenreportedasoneofthemostabundantanimalspeciesintheword．Itcontainsmanyhigh-valuedcomponents，such嬲lipids，proteins，astaxanthinandchitin．However，thedevelopmentoftheEuphausiasuperbaaShumans’foodislimitedbecauseofthehi幽concentrationsoffluorin