丹参对奶牛脂肪变性肝细胞nf-kb和cyp450表达的影响

《丹参对奶牛脂肪变性肝细胞nf-kb和cyp450表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据分类号：S墨53：Z垒密级：公珏单位代码：!QQ墨鱼学号：2Q!!垒25丹参对奶牛脂肪变性肝细胞NF．KB和CYP450表达的影响EffectsofSalviamiltiorrhizaonNF．．KBandCYP450expressionsinsteatosishepatocytesofdairyCOWS学位申请人：路丽芹指导教师：马玉忠教授学科专业：临床兽医学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：二。一四年五月二十九日万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，

2、除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：铬丽苗签字日期：纱f中年g月飞。日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解洄：j量壅些太堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权涸j匕壅些太堂可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描

3、等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：诌丽甾签字日期：7口C中年g月jD日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：别醛轹势肛签字日期：加什年g月3。日电话：邮编：万方数据摘要脂肪肝是奶牛常见病之一，且多发于围产期高产奶牛。脂肪肝不仅会导致奶牛产奶量下降，而且会诱发多种其他疾病，给养殖户带来巨大的经济损失。最近几年，奶牛脂肪肝的发病率呈现逐年上升趋势，但对于其发病原因及机制还不明确。虽然很多研究人员对其相关发病机理进行了大量的探究，但从细胞水平上，运用分子生物学技术手段来研究其发病机制并不多

4、见。关于CYP450和NF．r．B与奶牛脂肪肝形成关系的研究较少，其作用机制不甚明确，值得深入探讨和研究。本研究采用胶原酶两步灌流法，成功的分离培养了奶牛原代肝细胞。用DL．乙硫氨酸诱导肝细胞脂肪变性后，采用生化法测定ALT、AST、TG、TC的含量或活性，MTT法测定肝细胞的存活率，油红O染色法观察肝细胞内脂滴数量、颜色和大小。根据以上所测数据及对油红染色图片的观察和分析，筛选建立奶牛肝细胞脂肪变性模型的最佳条件。造模成功后，用不同浓度的丹参处理变性肝细胞，检测肝细胞中ALT、AST、TG、TC、SOD和MDA的含量或活性。采用ELISA

5、法检测奶牛肝细胞内TNF．0【的含量，油红O染色法观察肝细胞内脂滴数量、颜色和大小，Westernblot法检测肝细胞中NF．r．J3和CYP450的蛋白表达水平。本试验旨在探究TNF．a、NF．r．B和CYP450与奶牛脂肪肝的相互关系，揭示脂肪肝的发病原因及机制，为临床上疾病的预防和治疗提供参考。结果显示，用胶原酶两步灌流法分离到的肝细胞，形态完整，贴壁良好，存活率约94％，可用于本试验进一步的研究。DL．乙硫氨酸诱导肝细胞后，根据所测肝细胞中TG、TC含量变化结果，MTT法所测细胞存活率及对油红染色图片的观察和分析，最终选定2mmol

6、／L的DL．乙硫氨酸培养24h作为最佳的造模条件。丹参处理脂肪变性肝细胞后，能降低ALT、AST、TG、TC和MDA的含量或活性，抑制TNF．0【的释放，增加SOD活性。随丹参浓度增加和处理时间的延长，CYP450的表达呈逐渐降低的趋势。24h时，丹参对NF．1出的表达无明显影响；48h时，随丹参浓度的增加，NF．r．B的表达呈逐渐降低的趋势。丹参对奶牛肝细胞的脂肪变性有一定的治疗作用，可能与丹参能够改善脂质代谢紊乱、抑制TNF．a的释放、抗脂质过氧化反应以及降低NF．r．B和CYP450的表达有关。关键词：丹参；脂肪变性；肝细胞；NF．r

7、,B；CYP450万方数据EffectsofSalviamiltiorrhizaonNF-KBandCYP450expressionsinsteatosishepatocytesofdairyCOWSGraduatecandidate：LiqinLuAdvisor：Prof．YuzhongMaMajor：ClinicalVeterinaryMedicineAbstractFatty1iverwasoneofthecommondiseasesindairyCOWS．andoccurredintheperinatalperiodofhi。曲yi

8、elddairyCOWS，mostly．Fattylivernotonlyaffectedmilkyield，butalsocouldinduceavarietyofotherd