l-丝氨酸高产菌株筛选及摇瓶发酵条件优化

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1、V873612分类q料缎中1古编q：ju7j8‘7‘：：2()()30q!豪张袈专虫挚硕士学位论文L．丝氨酸高产菌株筛选及摇瓶发酵条件优化BrccdingofL—serineproducingstrainandoptimizationoffermentationcondition研究生：谩慧林指导教师：杨海燕副教授，合作指导教师崔盎生副研究亟申请学位类别：工学硕士专业领域名称：食品科学与工程研究方向：笪墨迂塑盟丕廛亚塞当查』周一一所在学院：食、％科学学院新疆刊々鲁小齐o(二)／’、{Ij“JJ摘要本文考察了L丝

2、氨酸基因工程菌株口Mvf6口c把胁MmⅢC-1lA的特点，初步研究了其摇瓶产酸条件和产酸能力。然后对其进行诱变处理，获得产酸较高的色氨酸营养缺陷型，并对其摇瓶发酵条件进行优化，提高L丝氨酸的产景。主要研究内容和结果如下：探明基因工程菌株日，w泐c把ri“m肋ⅢC．1lA为非营养缺陷型，具有丝氨酸分解能力缺陷，能阻断丝氨酸的分解，抗氯霉素、链霉素。用MPB活化富集菌体比用水活化富集菌体产酸高，实验选择浓度为0．3％K2P0t作为缓冲剂，，有机氮源实验选择酵母膏，无机氮源选择(NH4)2S04，CaC03与发酵培养

3、基分开灭菌。在仔细研究L丝氨酸生物合成的基础上，对基因工程菌丑，w曲口c把一“m伽ⅢC．11A进行诱变，结果发现单纯用皿硝基胍处理，菌株容易恢复突变，通过采用物理和化学结合诱变，最后获得一株色氨酸营养缺陷型稳定且产酸较高的突变菌株，将此菌株命名为c34。对C34进行摇瓶优化实验，确定较好的摇瓶发酵条件和培养基配方。种子培养基的配方为酵母膏1％，蔗糖浓度3％，K2P040．3％，发酵条件为初始pH为8．0，种龄为32—37有利于产酸。发酵培养基配方：(Nl{4)2S04为3％，接种景10％、酵母膏质量浓度1．2％

4、、富马酸质量浓度2％，蔗糖浓度为4％，发酵条件为：初始pH为8．4，500m】三角瓶装液量为20ml。关键词：L丝氨酸，发酵，重组菌，诱变AbstractThisarIickinspectedtllecharacteristicofI，seIillegeneengineeringstraill口r即胁c耙，fHm伽啪C-11A'andprelimillarystudieditsn鹪k-shakingfe珊entationcondiIion柚ditspIoduciⅡgL．sedneabilityfTllencaI

5、Iies∞toitiⅡducesmutati咖orchror∞so衄lchangepm。e醛ilIg，obtainstl坼tryptophannutrjⅡonnawt0obtainh蟾hL∞fine，蛐d叩timizesIheconditionofitsflask-sha“ngfe砷entati仰，incre船inglheI，seIil瞻．Themainre鸵archsconlent柚dthe托sIlltafeasfb玎ows：1．1n印ectinglhatgeneengineeringstrain口陀订加c据

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8、al，finallyobtaillsatryptophannutfitionnaw，whichsteadilyandpmducehiglILs坞inc，wenmeditC34．3．Carriesontllenask_sbakiⅡg0ptimizati∞t0C34，toget900dflask-shakingfe咖entaIi蚰conditionandcunuremedi哪fo姗u】a．