蛹虫草子实体活性多肽的提取分离方法及其部分生物活性的研究

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1、西南大学硕士学位论文蛹虫草子实体活性多肽的提取分离方法及其部分生物活性的研究姓名：宗静申请学位级别：硕士专业：药物分析学指导教师：李竞20120527中文摘要蛹虫草子实体活性多肽的提取分离方法及其部分生物活性的研究药物分析学专业硕士研究生宗静指导教师李竞副教授摘要蛹虫草，又名北冬虫夏草、北虫草，与冬虫夏草同属异种。研究表明蛹虫草具有与冬虫夏草极相似的有效成分和药用功效，如益精气、补虚损、抑菌、降压、镇静、降温、免疫作用等。但天然冬虫夏草资源有限、价格昂贵，不利于广泛应用，相比之下人工蛹虫草更经济实惠，因此很多人都认为蛹虫草可以从某种意义上替代冬虫夏草。对蛹虫草子实体中的化学成分

2、进行全面测定分析后得知其中含有蛋白质、脂肪、虫草酸、虫草素、虫草多糖、SOD酶以及一些微量元素，充分证实了蛹虫草的营养和药用价值。众所周知，多肽是机体完成各种生理活性必不可少的一种物质，在生物的代谢活动和疾病治疗中也起着不可取代的作用。因此该研究现已成为一大热点，但纵观目前国内外的研究报告，关于蛹虫草蛋白多肽类的报道却并不多，本文对蛹虫草子实体中多肽的提取、分离纯化及部分生物活性进行研究，旨在为日后蛹虫草蛋白多肽类物质的研究应用提供参考意见。本实验的研究内容及结果如下：1．采用水提醇沉法和酶解法制备蛹虫草子实体活性多肽提取液。两种方法均各从单因素考察和正交试验法确定了最佳工艺条

3、件。水提醇沉法的工艺条件为：温度4℃，时间6h，料水比1：10，pH9，水醇比l：1；酶解法的工艺条件为：胃蛋白酶和胰蛋白酶双酶水解，温度为42℃，时间为8h，底物浓度为6％，加酶量2．5％。2．对所制备的蛹虫草子实体的多肽提取液进行理化性质鉴定，并采用TriciIle．SDS．Page电泳法鉴定小分子肽的存在。结果显示：制备的提取液为淡黄棕色和棕黄色透明液体，蛋白质定性反应检测中均为阳性反应，紫外分光光度计于190．O-400．Onm范围内扫描知提取液在208衄(203nm)、260啪附近有两个吸西南大学硕十学位论文收峰；电泳结果显示提取液中含有小分子肽类物质。3．采用两步凝

4、胶色谱法分离蛹虫草子实体的多肽提取液，两步葡聚糖凝胶色谱法的分离条件分别为S印hadexG．100：柱30cm宰4．0cm，洗脱液为去离子水，洗脱速度为50mL／ll，上样体积为4mL，紫外检测器于28011In下检测；SephadexG．25：柱40cm+3．Ocm，洗脱液为去离子水，流速为loomL『ll，上样体积为3mL，紫外检测器于280IlIll下检测。经由S印hadexG．100柱洗脱出一个色谱峰，再经SephadexG．25柱分离检测，得到两个分离组分。4．分离出的组分分别进行氨基酸组成及含量分析，结果表明内含的氨基酸种类丰富齐全，人体所必需的氨基酸含量较高。5．

5、对分离出的组分进行部分生物活性研究，包括采用化学模拟体系进行的体外抗氧化研究、抑菌活性研究和免疫活性研究。结果表明分离出的组分具有一定的还原能力、清除羟基自由基的能力和清除超氧阴离子的能力；具有一定的T细胞免疫活性，但抑菌活性不明显。关键词：蛹虫草子实体小分子肽提取分离生物活性II英文摘要Studies0nextractionandseparationand1●1●lJ●●J●pJ●1一S0meD10109lCalaCtlVltleS0tDeDtldeStromfruitingbodiesofCandidate：ZongJing'一’一Supervisor：LiJingAbst

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