人工合成e-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤血脑屏障的影响与机制探讨

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1、中文摘要人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤血脑屏障的影响及机制探讨第二部分：人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤组织咬合蛋白（occludin）及闭锁小带蛋白-1（zonulaoccludens-1，ZO-1）含量表达的影响目的：探讨人工合成E-选择素对大鼠局部脑缺血再灌注损伤脑组织内皮细胞间紧密连接蛋白咬合蛋白（occludin）及闭锁小带蛋白-1（ZO-1）含量表达及位置结构的影响，从而初步探讨人工合成E-选择素对血脑屏障保护的作用机制。方法：采用改良的ZeaLonga线栓法建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，将90只雄性SD大鼠随机分为假手术组（A

2、组）、模型组（B组）和人工合成E-选择素干预组（C组），每组30只。各组大鼠分别在脑缺血2h再灌注3h、6h、24h、48h、72h5个时间点提取脑组织标本。采用免疫组化法观察缺血区脑组织occludin及ZO-1的位置结构及含量，Westernblot法半定量测定occludin及ZO-1的含量。结果：免疫组化：（1）A组occludin及ZO-1阳性细胞均沿血管丰富表达。（2）B组occludin及ZO-1都于缺血再灌注3h阳性表达数减少，24h阳性表达数降至最低，72h阳性表达有所增加，但仍低于A组。occludin表达的连续性在24h达到最差。（3）C组occludin及

3、ZO-1阳性表达数在各时间点均高于B组但低于A组。Occludin表达的连续性在24h也好于B组，差于A组。Westernblot半定量分析结果：（1）A组occludin及ZO-1蛋白表达水平无明显变化。（2）B组occludin及ZO-1蛋白的变化趋势相似，3h蛋白表达水平开始减少，6h继续减少，24h达到最低值，48h有所回升，72h仍低于A组。（3）C组各时间点occludin及ZO-1变化趋势同B组，但蛋白表达水平均高于B组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：1．局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠脑组织内皮细胞紧密连接蛋白occludin及ZO-1表达减少；2．人工合

4、成E-选择素血脑屏障的保护作用可能与其抑制occludin及ZO-1表达的减少以及维持occludin位置和结构有关。关键词：紧密连接；Occludin蛋白；ZO-1蛋白；人工合成E-选择素作者：葛志强指导教师：张世明教授II人工合成E-选择素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤血脑屏障的影响及机制探讨中文摘要TheeffectsandmechanismsofartificialsyntheticE-selectinonBlood-brainbarrierpermeabilityafterfocalcerebralischemiareperfusioninratsAbstractPart

5、1TheeffectsofartificialsyntheticE-selectinonBlood-brainbarrierpermeabilityaftercerebralischemiareperfusioninratsObjective:TostudytheeffectofartificialsyntheticE-selectinonBBBpermeabilityandinfarctionandedemavolumeaftercerebralischemiareperfusioninjuryinrats.TheimprovementofZeaLongawasusedtoes

6、tablishefocalcerebralischemiareperfusioninjurymodel.Methods:90maleSDratswererandomlydividedintosham-operationgroup(groupA),ischemia-reperfusiongroup(groupB)andartificialsynthesizedE-selectintreatedgroup(groupC),with30ratsineachgroup.Themiddlecerebralarteryocclusion(MCAO)referringLonga'smethod

7、andaddedsomerefinementswasusedtoestablishthefocalcerebralischemiamodel.10minitesbeforebuildingthemodels,eachratofgroupCwereinjectedintofemoralveinwithartificialsyntheticE-selectin(10mg/kg).Eachratoftheexperimentwereinjectedintofemoralveinwith