泛素化对多器官功能障碍综合征脾脏树突状细胞功能的调节作用与机制研究

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1、分类号密级公开UDC保密期限博士学位论文题目泛素化对多器官功能障碍综合征脾脏树突状细胞功能的调节作用与机制研究作者姓名李菲指导教师陆江阳教授培养单位解放军总医院第一附属医院专业名称病理学与病理生理学论文提交日期2012年5月21日学位授予单位中国人民解放军军事医学科学院答辩委员会主席中国人民解放军军事医学科学院制军事医学科学院研究生学位论文独创性声明秉承军事医学科学院严谨的学风和科研作风，本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行的研究工作和取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢之处外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得军事医

2、学科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。论文作者签字：签字日期：年月日军事医学科学院保护知识产权声明本学位论文作者完全了解军事医学科学院对研究生在学其间撰写的论文知识产权保护的相关规定。本人撰写的论文是在导师具体指导下，并得到相关研究经费支持下完成的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属军事医学科学院。本人保证毕业后，以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为军事医学科学院。军事医学科学院有权保留学位论文及其电子版，公布论文的全部或部分内

3、容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文、汇编以供查阅和借阅。（保密学位论文在解密后适用本声明）论文作者签字：签字日期：年月日指导教师签字：签字日期：年月日军事医学科学院博士学位论文目录缩略词表...........................................................1中文摘要...........................................................3英文摘要..........................................................

4、.5前言...............................................................9材料与方法........................................................11一、实验材料...................................................111、实验试剂与药品...........................................112、实验仪器...................................

5、..............12二、实验动物模型与分组.........................................131、实验动物模型.............................................132、实验分组.................................................14三、标本采集与处理.............................................14四、实验方法.........................................

6、..........141、脾脏组织HE染色光镜观察..................................14+2、脾脏组织免疫荧光染色标记CD11cDC数量....................153、小鼠脾脏DC的分离与提取..................................154、小鼠胸腺T淋巴细胞的分离与提取...........................175、流式细胞术检测分离细胞纯度及DC凋亡率和表面CD86、MHC-Ⅱ.176、Real-TimePCR检测各种因子mRNA水平的表达...............

7、.187、WesternBlot检测MHC-Ⅱ和MARCH1蛋白的表达...............228、免疫共沉淀检测MHC-Ⅱ蛋白的泛素化水平....................259、pMB-HA-MARCH1真核表达载体的构建.........................2510、pMB-HA-MARCH1真核表达载体和SiRNA的脂质体转染进DC......3011、Annexin-V/PI双标记染色法检测DC凋亡率..................3012、MTT法检测T细胞增殖活性.............................

8、...30