脾脏抗原提呈细胞在多器官功能障碍综合征免疫失衡中作用的研究

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1、中国人民解放军军医进修学院硕士学位论文脾脏抗原提呈细胞在多器官功能障碍综合征免疫失衡中作用的研究姓名：李志宏申请学位级别：硕士专业：病理与病理生理学指导教师：陆江阳;王晓虹2003.6.6军睡进修学院j鲠士学位论文英文缩路词缩写MODSSlRSAPC转CFDClDeIL-12ELlSAFCMFl怼PED矗BPBS∞TUNELM}{SMHCHLAThC1tTCRP8碰e英文缩珞词英文垒称MultipleorgansdysfunctionsyndromeSystemicinflammatoryresponsesyndromeAntigenpresentingcellDendr

2、iticcellFolliculardendriticcelltnterdigRatingdendriticcellInterleukin．12Enzyme—linkimmunesorbentassayFlowcytometry．FluorescenceisothiocyanatePhycoerythrinDiaminobenzidinePhosphatebufferedsalineOpticaldensityTerminal-deoxynocleotidyltransferasemediatedd-UTPnickendlabelingMajorhistocompatib

3、ilitysystemMajorhistocompatibilitycomplexHumanleukocyteantigenThelpercellCytotoxicTlyre砖ocyteT-cellantigen·specificreceptorPeripheralbloodmononuelearcell牵文名称多器官功能障碍综合经全身性炎症反应练合征抗原提呈细胞橱突状细胞滤泡树突状细胞劳摇姨褥突状缁魏自介素12酶联免痰吸辫分耩法流式细胞术簿琉鬣羧荧光素藻红蛋自二氯基苯联鼗磷酸盐缓冲液毙密度脱氧核苻酸末端转移酶奔导的缺日末端标记法主要组织籀容性系统主要组织相容性复合体入类

4、自纲穗抗原T辅助细胞缓蕤毒彳游墨缱魏T细胞抗原受体努髑盘攀个拨缁藏军医进修学院硕士学位论文中文摘要脾脏抗原提呈细胞在多器官功能障碍综合征免疫失衡中作用的研究中文摘要目的：观察外周免疫器官一脾脏树突状细胞的形态和分布，探讨树突状细胞和以树突状细胞为主导的抗原提呈细胞及其相关细胞因子在MODS免疫失衡中的变化规律及意义，进一步丰富创伤免疫学的研究内容，也为MODS的临床防治提供新的理论依据。方法：选取雄性C57BL／6小鼠220只，6-8周，体重20．25克，分为正常对照组和实验组。实验组小鼠腹腔注射过量酵母多糖复制MODS模型，按不同时相分为伤后3小时、12-48小时、5—

5、7日与10．12日组。各组有效检测和取材的动物均为30只。收集严重创伤、烧伤、感染、脓毒症等导致的MODS病例15例，作为MODS组。选取健康人因急性外伤脾切除与突发意外死亡行尸检的脾脏标本16例，作为正常对照组。观察各组小鼠症状、体温、体重及脾脏湿重的变化。运用光镜和透射电镜观察各时相小鼠与I临床MODS病例脾脏的病理变化。同时用TUNEL方法检测脾脏细胞凋亡现象。运用免疫组化的方法，检测各组小鼠／临床病例脾脏中DC对CD205、CD86、S-100及CDIa的表达，判断了不同实验组脾脏DC分布和含量的变化；同时观察脾脏DC／APC对MHC．JI类分子和IL．12p40

6、的表达。运用流式细胞术检测各组小鼠外周血T细胞亚群和DC／APC对I．Ab表达的变化。运用ELISA的方法检测小鼠脾脏组织匀浆和血清中IL．12p40和IL．12p70水平的变化。结果：1．正常脾脏观察：小鼠与人脾脏中DC分布以边缘区和滤泡生发中心为主，在白髓与脾索中也有少量分布。小鼠脾脏中DC含量约为l一2‰，人体脾脏中DC含量约为3-4％o。2．动物实验研究：伤后3小时组，实验鼠体温、体重均明显下降。脾自髓增宽，淋巴细胞丰富。脾脏DC数量增加，体积增大。脾脏DC／APC军医避罄学院颟士学位论文辛文摘要对CD205、CD86、I-岔、魏．12r,40表达筠鞠避辔熬。矮瘸

7、蠢孛萃棱缨德霹0舻表达及CD4+T细胞数均减少，CD4／8比值下降。脾脏组织匀浆和血清中IL．12p40升离，嚣IL。12p70翻下簿。伤嚣12-48小蠢重绥，实验鬣体温、体重继续下降。耱鸯髓萤缩，淋鼠细胞减少，凋亡现象显著。DC数量仍较多，但出现溶解变性与凋亡改交。膊驻DC／APC对CD205、CD86、}”表这鞠减少，懿IL．12p40表达增杰噩。外周血中单核细胞I，Ab表达及CD4+T细胞数继续减少，CD4／8比值明显下降。脾脏缀织匀浆翻盘溥巾lL．12：p40蠢离，雨IL一12p70姻下簿至最低点。伤螽5．7醴缝，实验