cox-2通过jnk信号通路调控胃癌细胞bcl-2蛋白的表达

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1、目录中英文缩略词表----------------------------------------5中文摘要----------------------------------------------6英文摘要----------------------------------------------8前言--------------------------------------------------10实验材料----------------------------------------------13实验方法------------

2、----------------------------------18结果--------------------------------------------------21讨论--------------------------------------------------25结论--------------------------------------------------28参考文献----------------------------------------------29附录----------------------

3、----------------------------32致谢--------------------------------------------------33综述--------------------------------------------------34综述参考文献------------------------------------------401中英文缩略词表COX-2Cyclooxygenase-2环氧合酶2JNKc-JunNterminalkinasec-Jun氨基端激酶Bcl-2B-cellleukemia

4、/lymphoma-2B细胞白血病蛋白2CSCalfserum小牛血清DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜DMEMDulbecco’smodifiedDulbecco改良的Eagle’smediumEagle培养液EBEthylenebromide溴化乙锭ECLEnhancedchemiluminescence增强化学发光术TAXPaclitaxel紫杉醇PBSPhosphatebufferedsaline无钙镁的磷酸盐缓冲液SDS-PAGESodiundodecylsulfate十二烷基硫酸钠-polyacrylamindg

5、eleletrophoresis丙烯酰胺凝胶电泳TBSTTrisBufferedSalinTween-20Tris缓冲盐水+吐温TEMEDN,N,N’,N’-四甲基乙二胺TetramethylethylenediamineSPSSStatisticalProductand社会科学统计ServiceSolutions软件包2COX-2通过JNK信号通路调控胃癌细胞Bcl-2蛋白的表达摘要背景及目的:晚期胃癌的化疗疗效差多与化疗耐药相关。大量的研究发现,胃癌细胞中常可检测到过表达的COX-2和Bcl-2蛋白,它们的过表达常与肿瘤细胞对化疗药物的耐

6、药性增高,预后较差相关。近期研究结果显示COX-2与Bcl-2蛋白表达关系密切,但COX-2调控Bcl-2表达的机制尚不清楚。据此我们选取胃癌细胞株BGC-823作为研究对象,通过低剂量紫杉醇持续刺激诱导COX-2蛋白表达增加,在此基础上,分别加入COX-2抑制剂NS398,JNK通路抑制剂SP600125,观察JNK蛋白及BCL-2蛋白表达的变化,了解JNK通路在COX-2调控Bcl-2表达中所发挥的的作用。方法:在胃癌细胞BGC-823中加入低剂量紫杉醇,持续作用72h,通过Westernblot测定COX-2蛋白表达情况,根据结果将细胞

7、分为COX-2高表达组与对照组。分别在两组中加入COX-2抑制剂,观察JNK,p-JNK蛋白表达情况;加入JNK通道抑制剂SP600125,观察Bcl-2蛋白表达情况,通过spss.12.0统计软件对相关数据进行分析和总结。结果:在胃癌细胞株BGC-823中COX-2及Bcl-2均有表达,紫杉醇可诱导COX-2及Bcl-2蛋白表达增加,并随作用时间延长,表达量呈上升趋势。COX-2高表达组,JNK蛋白磷酸化程度显著低于对照组,加入COX-2的特异性抑制剂NS398后,JNK蛋白蛋白磷酸化程度增高。两组同时加入JNK通道特异性抑制剂SP6001

8、25后,Bcl-2蛋白表达均增加。结论:在胃癌细胞BGC-823中,JNK通路在COX-2调控Bcl-2蛋白表达中发3挥一定作用。关键词:胃肿瘤环氧合酶2JNK促有

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