大鼠纹状体内注射lv-shh促进帕金森病模型大鼠神经再生

《大鼠纹状体内注射lv-shh促进帕金森病模型大鼠神经再生》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、南方医科大学2009级硕士学位论文大鼠纹状体内注射LV-Shh促进帕金森病模型大鼠神经再生IntrastriataladministrationofLV-ShhstimulatesneuroregenerationinParkinsondiseasemodelrats课题来源：广东省自然科学基金[编号：07301608】佛山市顺德区医学科研基金[编号：20110502011】佛山市医学类科技攻关项目[编号：201008063】专业名称学位申请人指导教师答辩委员会主席答辩委员会成员人体解剖与组织胚胎学张易董为人教授曾园山教授李艳萍教授欧阳钧教授罗深秋教授郭家松教授论文评阅人

2、张琳教授郝彦利副教授2012年04月20日广州硕士学位论文大鼠纹状体内注射LV_Shh促进帕金森病模型大鼠神经再生硕士研究生：张易指导教师：董为人教授摘要背景：帕金森病(Parkinsondisease，PD)是由于黑质多巴胺能神经元(dopamine酉cneurons，DANs)进行性丢失，导致纹状体尾状核．壳核多巴胺(dopamine，DA)支配丧失，引起静止性震颤、肌强直和运动障碍等症候群，其发病率逐年增高，目前临床尚无特效疗法。主要的药物治疗大多是暂时缓解症状。左旋多巴及多巴胺能受体激动剂只能缓解疾病早期的运动障碍，长期服用可能会造成许多副作用，如左旋多巴诱导的运

3、动障碍，“开关”现象，幻觉，嗜睡等。此外，非药物疗法如深部脑刺激虽然可以改善患者的运动障碍和生活质量，但具体的机制仍然不明确，且可能造成新的损伤。目前认为，细胞替代疗法(cellreplacementtherapy,CRT)可能是治疗帕金森病的最佳途径之一。它与以往传统的以缓解症状为主的治疗方法不同，细胞替代疗法是建立在更全面认识帕金森病的发病机制的基础上，以替代和修复变性和坏死的多巴胺能神经元为目的的疗法。而传统的外源性细胞替代疗法是采用胚胎干细胞(emb叫omcstemcells，ESCs)，神经干细胞(neuralstemcells，NSCs)或者骨髓间充质干细胞(

4、bonemarrow．derivedmesenchymalstemcells，BMSCs)进行移植，但研究表明这种移植方式尚面临来源受限、移植后功能差、低存活率、安全性不确定、临床可操作性差以及伦理学问题等，且移植后可致运动障碍，出现步态失调、跌倒、强直、甚至痴呆等非多巴胺能病理特征，植入的DANs存中文摘要活率低，其内甚至出现Lewy小体。有鉴于此，本课题提出内源性CRT设想：在外源性因素的刺激下，宿主内源性神经干细胞或神经前体细胞增殖、迁移至损伤部位并原位分化为局部细胞，最终在结构和功能上恢复受损组织。在成体中枢神经系统(centralnervoussystem，CN

5、S)存在有两个干细胞壁龛，分别是侧脑室脑室下区(subventricularzone，SVZ)和海马齿状回(dentategyms，DG)。其内的神经干细胞终生持续处于增殖状态和神经元替代现象，并沿一定路径迁移。而且SVZ是成体神经系统中最大的干细胞库。因此，通过外源性的刺激营造SVZ内的NSCs(SVZ-NSCs)增殖、迁移至黑质．纹状体系统，分化为多巴胺能神经元并原位与周围的神经元整合而产生有功能的内环境，从而达到治疗的效果，这可能是治疗帕金森病的新思路。我们在文献调研中发现，Sonichedgehog(SHH)为影响神经系统发生、发育乃至中脑多巴胺能神经元形成的众多

6、相关因子中最为关键的核心因子。SHH为Hedgehog家族成员之一，另外两个家族成员分别是deserthedgehog(DHH)和Indianhedgehog(IHH)。SHH是涉及在胚胎发育中重要的分泌性多肽之一。它最初是由脊索和底板所分泌，在胚胎发育过程中调节多种组织器官的形成和发生。它是CNS模式、增殖和细胞命运调节的关键性信号分子。SHH信号为出生后和成体脑内NSCs和神经发生的关键性机制，并维持终生。此外，文献也报道SHH具有促进多种神经元增殖、分化、促进轴突生长和轴突导向以及神经元的营养和保护等作用。其前体蛋白合成后自我催化裂解为分子量为19l①的N端片段州．

7、terminalproductofShh，SHH-N)，而SHH的功能区主要集中在N端，而非C端，且C端易造成整个蛋白肽链的断裂。因此，本实验的研究重点集中在SHH．N。II硕士学位论文目的：本课题拟在克隆出目的基因Shh-N并将其构建至慢病毒载体的基础上，以帕金森病大鼠为模型(立体定位注射6．羟基多巴(6．OHDA)损毁大鼠纹状体)，将包装成功的病毒颗粒立体定位注射于大鼠纹状体的损毁区域，检测Shh在体过表达的情况，鉴定损毁区域神经修复(残存或新生神经元／神经胶质细胞，黑质．纹状体通路)情况，结合行为学观察，试图证实内源性治