参莲提取物的血管作用及其机制的研究

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1、陕西中医学院硕士学位论文参莲提取物的血管作用及其机制的研究姓名：李丹申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：胡锡琴201204摘要目的：参莲提取物由丹参和穿心莲组成，是以活血化瘀、清热解毒为法组方用以预防、治疗动脉粥样硬化的中药复方提取物。本实验旨在研究参莲提取物对离体家兔胸主动脉条及胸主动脉环的作用及其可能的机制，参莲提取物及丹参的脂溶性成分对平滑肌细胞增殖的作用。方法：将家兔离体主动脉条置于灌流肌槽中，记录参莲提取物对去甲肾上腺素(NE)、氯化钾(KCI)、氯化钙(CaCl2)诱导的主动脉条收缩作用的影响，以及对NE

2、诱导的主动脉条细胞内钙及细胞外钙依赖性收缩反应的影响；采用离体家兔胸主动脉环灌流装置，观察去甲肾上腺素(PE)预收缩下，参莲提取物对内皮完整及去内皮血管环的舒张作用。以NO清除剂Hemoglobin、亚甲蓝(MB)、左旋硝基精氨酸甲酯盐酸盐(L-NAME)、甲基异硫脲硫酸盐(SMT)及钾通道阻断剂四乙胺(TEA)和格列苯脲(GLB)预处理血管环，观察对参莲提取物内皮舒张作用的影响。用SRB法检测参莲提取物对平滑肌细胞增殖反应的影响。结果：参莲提取物200IJUmL、400ug／mL对NE所致收缩反应无显著拮抗效应(P>O

3、．05)；600pg／mL、8001．tg／mL、lmg／mL可使NE诱导的主动脉条最大收缩反应分别降低60．49％、59．94％、58．59％(P<0．01)，Ver可使最大反应降低45．61％(P<0．05)。参莲提取物200ug／mL、400ug／mL、600pg／mE、800lag／mE、lmg／mL可以使CaCl2诱导的主动脉条最大收缩反应分别降低23．01％、40．31％、95．38％、109．5％、92．71％(P<0．01)，Vet可使最大反应降低132．24％(P<0．01)，呈明显非竞争性拮抗效应。参

4、莲提取物200ug／mE对KCL所致收缩反应无显著拮抗作用，400lag／mE、600lJg／mL、800IJg／mL、lmg／mL可以使KCL诱导的主动脉条最大收缩反应分别降低27．4％、37．18、55．14％、38．98％(P<0．01)，Ver可使最大收缩反应降低61．11％(P0．05)，但对ICE诱发细胞外钙依赖性收缩有显著抑制作用(P<0．01)。Vcr能明显抑制细胞外Ca2+内流引

5、起的收缩反应(P0．05)。参莲提

6、取物的血管舒张反应不被Hemoglobin和亚甲蓝所阻断(P>O．05)。经NOS抑制剂孵育后，参莲提取物的血管舒张反应被抑制(PO．05)，钙离子激活钾通道阻断剂TEA可抑制参莲提取物的扩血管作用(P

7、lag／mL、125lag／mL之间无显著差别(P>0．05)。丹参脂溶性成分对HUASMC三个时间点的A值测定。24h．72h时，对于HUASMC细胞，实验组与对照组相比，细胞生长受抑制的差异显著(P<0．01)。结论：参莲提取物既对PDC类Ca2+通道可能有明显影响，又能通过非竞争性拮抗ROC类Ca2+通道开放影响主动脉条收缩，即参莲提取物对PDC和ROC有双重抑制作用。同时，还可能通过影响细胞外Ca¨内流从而影响主动脉条收缩。参莲提取物对离体兔胸主动脉具有部分内皮依赖性舒张作用，其内皮依赖性血管舒张作用与激活eNO

8、S和iNOS有关，钙离子激活钾通道可能参与了其非内皮依赖性血管舒张效应。参莲提取物对平滑肌细胞增殖有一定的抑制作用，其组方的作用大于丹参脂溶性成分的作用。关键词：参莲提取物、胸主脉、血管收缩与舒张、平滑肌细胞E腑ctofShenLianExtractsonRabbitThoracicAortaandtheCultur