怀牛膝对兔骨性关节炎软骨组织影响的实验研究

怀牛膝对兔骨性关节炎软骨组织影响的实验研究

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时间:2019-02-25

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1、湖北中医药大学博士学位论文怀牛膝对兔骨性关节炎软骨组织影响的实验研究姓名:柯晖申请学位级别:博士专业:中医骨伤科学指导教师:邹季20120320中文摘要目的观察骨关节炎模型兔膝关节软骨组织的病理生理变化,探讨怀牛膝对骨关节炎模型兔膝关节软骨组织的作用机制,为中医药防治骨性关节炎的实验研究与临床应用提供一些依据。方法新西兰大白兔随机分为正常组、模型组、治疗组(怀牛膝)、对照组(西乐葆),其中治疗组分为怀牛膝高剂量、中剂量和低剂量三组。参照Hulth造模法制作实验性兔骨关节炎模型。造模一周后开始给药,连续治疗6周后取材,分别检测病灶软骨组织形态及病理生理学相关因子的变化,具体分四个部分:1采用组织

2、化学法制备软骨组织标本及切片,在光镜和电镜下观察病灶软骨组织形态学变化.2在切开病灶膝关节之前抽取关节液,采用化学比色法检测关节液中NOS、SOD的含量.3运用免疫印迹法分别检测滑膜组织中MMP-3、删P一13、TIMP-1表达,通过图像分析系统比较各组之间差异。4运用免疫组织化学技术分别检测软骨组织IGF-1和Ⅱ型胶原,通过图像分析系统比较各组之间差异.结果1组织形态学变化:正常组关节软骨组织表层光滑、平整,软骨细胞分布均匀;模型组软骨组织表层明显交薄甚至消失,可见细胞簇集,软骨细胞排列紊乱;治疗组中怀牛膝高、中剂量组和对照组软骨组织破坏程度明显减轻,少数区域可见软骨细胞排列不规则;怀牛膝低

3、剂量组和模型组差别不大。各组软骨组织评分中模型组较正常组评分明显升高(P<0.01);怀牛膝高、中剂量组和对照组较模型组显著降低(P<0.01);怀牛膝高、中剂量组组间比较无明显差异,但分别较对照组存在差异;怀牛膝低剂量组与模型组之间差异不明显(P>0.05).电镜下观察正常组软骨细胞基本正常;模型组软骨细胞外形不规则,软骨细胞有固缩现象;怀牛膝高、中剂量组软骨细胞轻度异常,部分出现空泡,胞浆内细胞器增多;且细胞损伤程度好于对照组和怀牛膝低剂量组。2关节液中NOS含量模型组较正常组明显升高(P

4、S含量低于中剂量组;怀牛膝低剂量组与模型组间无明显差异(P>0.05)。关节液中SOD含量模型组较正常组明显降低(P<0.01);怀牛膝高剂量组SOD含量高于中剂量,且两组均比模型组明显升高(Po.05).3病灶侧滑膜组织中MMP-3和删P一13在治疗组中怀牛膝高、中剂量组和对照组之间差异不明显(P>o.05),三组与模型组之间比较差异明显(P

5、IMP-I数值与模型组间无明显差异(P>0.05).4病变组织中IGF-I表达怀牛膝高剂量组高于中剂量组(P<0.01),且两组均明显高于对照组、怀牛膝低剂量组和模型组(P0.05)。结论怀牛膝有延缓OA模型中软骨组织退变的作用,且相对与西乐葆具有一定优势;怀牛膝通过改变OA病变软骨组织中NOS、SOD活性,保护软骨组织延缓病情发展,并且这一作用存在量效关系;怀牛膝能通过抑制MMPs表达以及增加TIMP-I表达来控制O

6、A病情;有效浓度的怀牛膝能通过提高0A软骨组织中的IGF-I和Ⅱ型胶原蛋白的表达以延缓病情发展.主题词骨关节炎;怀牛膝;电镜;细胞因子ExperimentalStudyonAchyranthesbidentataagainstArtiCUIarCart.IageInfIuenceofOAModeIsofRabbitsSpeoiality:OrthopaediCSAuthor:KeHuiTutor:Prof.ZouJiObjectiveABSTRACTObservedthepathophysi0109icalchangesofthekneejoint’SarticularcartilageofO

7、SteoarthritiSmodelofrabbit,tofurtherexplorethenosogenesiSofOSteoarthritiSandanalysiSth沁⋯Achyranthesbidentatamechanism0faction0fOArabbitkneecarti1age,toprovidesomebasiSforexperimentalresearchandCIinica

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