sirna干扰ngr及联合nt-3对大鼠脊髓损伤修复的影响

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1、万方数据中图分类号&§主!：2UDC610硕士学位论文学校代码10533密级公珏siRNA干扰NgR及联合NT-3对大鼠脊髓损伤修复的影响TheeffectsofNgR-siRNAandNT-3genetransfectiononspinalcordinjuryreparationinrats作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：王惟达临床医学外科学湘雅三医院詹瑞森教授论文答辩日期童卑答辩委员会主席邈中南大学2014年5月万方数据学位论文原创性声明

2、』IIIJIIIIIIIIUlfllIllIIIfY2687182本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作

3、及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：牟日期：也年由笪日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段

4、保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：韭万方数据SiRNA干扰NgR及联合NT-3对大鼠脊髓损伤修复的影晌摘要目的：研究siRNA干扰NgR及联合NT-3基因转染的神经干细胞对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法：选用SD大鼠108只，雌雄不限，体重2009--2509。完全随机分为假手术组(n=27)、手术对照组(n=27)、NgR．siRNA组(n=27)和NgR-siRNA联合NT-3组(n-27)。按照手术后以下9个时间点12h、1d、2d、3d、5d、7d、14d、21d和28d再分为9小组，每小组3只。制作大鼠脊髓T8水平后侧半横断直接切割模型。自损伤处向头尾两端缓慢

5、注入相应细胞悬液，5min内注射完毕并留针5min，并用生物胶封闭针孔防止细胞悬液顺针道溢出。相应时间点取出横断切口上下各5mm，共10mm脊髓组织。利用QPCR、Wb测定bFGF、NGF、MBP基因及蛋白表达的变化，综合评价siRNA干扰NgR及联合NT-3对大鼠脊髓损伤后修复的影响。对所得数据用均数、标准差进行描述；组内比较采用方差分析，并采用SNK法行两两间比较。结果：1、QPCR基因表达结果示：siRNA干扰NgR联合NT-3组优于siRNA干扰NgR组，而siRNA干扰NgR组优于手术对照组。2、Wb结果示：bFGF表达在术后3周内siRNA干扰NgR联合NT-3组优于假手术组，到第

6、4周bFGF与假手术组无统计区别；NGF表达在术后3天内，各实验组与假手术组无统计差异；1周到3周这段时间，各实验组NGF表达量均高于假手术组，各实验组间无统计学差异；MBP表达量术后第1天到第四周，siRNA干扰NgR联合NT-3组优于siRNA干扰N出组，而siRNA干扰NgR组优于假手术组。结论：1、siRNA干扰ngR的神经干细胞移植到大鼠损伤脊髓可促进脊髓修复；2、siRNA干扰NgR联合NT-3基因转染的神经干细胞移植到大鼠损伤脊髓可促进脊髓修复，且强于siRNA干扰NgR的神经干细胞移植对损伤脊髓的修复。图69幅，表6张，参考文献48篇。关键字：脊髓损伤；ngR基因；NT-3；s

7、iRNA干扰分类号：R651．2II万方数据spinalcordinjuryreparationinratsAbstractObjective：TostudytheeffectsofNgR-siRNAandNT-3genetransfectiononcordinjuryreparationinrats．Method：108SDratswerechosen,maleorfemale，ofwhichweightsvariedform200—2509．Theseratswerecompletelyrandomlydividedintoshamegroup(n=27)，operationgroup(n

8、=27)，N啦-siRNAgroup(n．27)andNgR-siRNA+NT-3group(n=27)．Eachgroupwasdividedinto9subgroups，eachofwhichincluded3rats，inthelightofthetimeaReroperation：12hld，2d，3d，5d，7d，14d，21dand28d．Thehemisectionmodelofco