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1、第41卷分析化学(FENXIHUAXUE)摇研究报告第5期摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇摇2013年5月ChineseJournalofAnalyticalChemistry771~775DOI:10.3724/SP.J.1096.2013.20868在线二维柱切换鄄高效液相色谱法同时测定婴幼儿强化奶粉中维生素A、D和E的含量312211*1张艳海摇朱晓艳摇曹国洲摇杨新磊摇张丽娟摇金燕12(赛默飞世尔科技(中国)有限公司,上海201203)摇摇(宁波出入境检验检疫局,宁波315012)摘摇要摇使用双梯度液相色谱系统紫外检测器,建立了
2、二维液相色谱法全自动、快速、同时测定婴幼儿奶粉中维生素A,D,E的含量。采用了非水反相系统,以AcclaimC柱为一维分析柱,AcclaimPA域C柱为二维分31818析柱。利用一维色谱柱完成维生素A和E的分离测定和维生素D的净化分离;利用二维色谱柱完成维生素D的分析。一维分析以乙腈鄄甲醇体系作为流动相,流速0.6mL/min;二维分析以乙腈鄄异丙醇体系作为流动相,流速0.8mL/min,梯度洗脱。检测波长为325,296和263nm,采用波长切换方式,整个分析过程仅需28min。维生素D在20~2000滋g/L范围内的相关系数r为0.9998,平
3、均回收率为100.7%;维生素A在1.71~855mg/L3浓度范围内的相关系数r为0.9979,平均回收率为114%;维生素E在4.12~1030mg/L范围内的相关系数r为0.9995,平均回收率为94.0%。本方法可快速准确测定婴幼儿乳品中维生素A、D和E的含量。3关键词摇高效液相色谱;二维色谱柱;双样充系统;婴幼儿配方奶粉;维生素D;维生素A;维生素E1摇引摇言婴幼儿配方奶粉又称为母乳化奶粉,是一种以牛乳(或其它动物乳)为主要原料,通过调整成分模[1]拟母乳,可供婴幼儿生长和发育所需要的一种人工食品。根据国家标准中有关奶粉营养成分规定,维生
4、素指标中必须强化的包括维生素A、维生素D和维生素E及其它水溶性维生素等;其中维生素D[2~4]在实际母乳中含量极低,约为4~40IU(国际单位)/L(0.1-1.0滋g/L),主要对应形式为维生素D3[4,5]和25鄄OH维生素D,因此通常将维生素D制成水可分散性的微粒形式,添加到婴幼儿强化奶粉33[5,6]中。关于奶粉中维生素A、D和E的测定方法的报道较多,其中高效液相色谱法是常用的分析方法。由于样品基质复杂,3种维生素对温度、光照、氧气和极端的pH值较敏感,且多数经过包被后再添加到[7][8,9]食品基质中,因此分析方法常包括皂化破壁、有机溶剂
5、萃取,浓缩和净化等步骤,在现行标准分析[9]方法中,需采用正相制备色谱、反相分析色谱两套仪器,分别进行净化制备和分析,前处理过程极其繁琐,大大影响样品分析效率。本研究采用在线二维柱切换鄄高效液相色谱紫外检测法,样品经过皂化、萃取后,直接进样,同时完成维生素A,D和E的分析测定,提高了方法的准确性和样品分析效率。2摇实验部分2.1摇仪器与试剂双三元液相色谱系统(美国赛默飞世尔科技公司);配置6通道真空脱气机SRD3600,双梯度分析型色谱泵DGP3600,自动进样器WPS3000TSL,二极管阵列检测器DAD3000,柱温箱TCC鄄3000(配有两个
6、六通阀),变色龙色谱管理软件Chromeleon7.1SR1。Acclaim120C(150mm伊3.0mm伊3滋m),18Acclaim120PA域C(150mm伊4.6mm伊3滋m)。18KOH(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);异丙醇、乙腈、甲醇(色谱级,Fisher公司);抗坏血酸(逸95%,分析纯,国药集团化学试剂有限公司);维生素D、维生素D(逸95%,HPLC级,供含量测定23用,中国药品生物制品检定所);维生素A(>95%,AcrosOrganics公司);维生素E(逸96%,HPLC级,Sigma)。去离子水(Millipore
7、纯水机制备)。婴幼儿配方奶粉和液态乳品(市售)。摇2012鄄08鄄27收稿;2012鄄11鄄13接受*E鄄mail:jinyanwc@sina.com7摇72摇分析化学第41卷2.2摇色谱条件一维分析泵的流动相A为甲醇,流动相B为乙腈,流动相C为甲醇鄄四氢呋喃(80颐20,V/V),Acclaim120C为一维分析柱,流速为0.6mL/min;二维分析泵的流动相A为乙腈,流动相B为异丙醇,18Acclaim120PA域C为二维分析柱,梯度洗脱程序见表1,流速为0.8mL/min,柱温30益,检测波长:180~5min,325nm;5~12min,2
8、96nm;12~30min,263nm。进样50滋L。表1摇一维分离和二维分离梯度程序Table1摇Gradientpro
