profilin-1在ages诱导的大鼠心肌病变中的作用研究

《profilin-1在ages诱导的大鼠心肌病变中的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、万方数据中图分类号＆§垒!：垒UDC互!Q硕士学位论文学校代码!Q§曼三密级公珏Profilin．1在AGEs诱导的大鼠心肌病变中的作用研究Effectofprofilin一1onMyocardiallesionsinratsinducedbyAGEs作者姓名：学科专业：研究方向：学院(系、所)：指导教师：’晶

2、J指导教师：刘伟伟临床医学内科学(心血管内科学)湘雅医院杨天伦教授陈美芳论文答辩日期丕!望生三旦拿目答辩委员会主席二查竺焦中南大学二0一四年五月万方数据学位论文原创性声明IYInllIl2IIIIIl6IIIIll8lll

3、lu7452Im哪眦帆呲㈣眦眦吣岫本人郑重声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任。作者签名：日期：出年』月旦日学位论文版权使用授权书本学位论文作者和指导教师完全了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定：即学校有权保留并向国家有关

4、部门或机构送交学位论文的复印件和电子版；本人允许本学位论文被查阅和借阅；学校可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保存和汇编本学位论文。保密论文待解密后适应本声明。作者签名：日期：驰年上月旦日导师签名日期：玉丛年』月毕日}万方数据硕士学位论文中文摘要Profilin．1在AGEs诱导的大鼠心肌病变中的作用研究摘要背景糖尿病心肌病变(Diabeticcardiomyopathy，DCM)是糖尿病致死的主要并发症。目前认为DM的发生与发展主要与AGEs生成增多密切相关，AGEs可通过直接或

5、间接通路引起氧化应激，内皮功能障碍，组织损伤与重构等。研究发现AGEs／RAGE信号通路是最为重要的一条信号通路，推测其可能是防治DCM的重要治疗靶点。在心血管组织中表达的profilin．1是关键的肌动蛋白调节蛋白，可直接影响细胞骨架(cytoskeleton)l拘结构，而研究发现细胞骨架结构的改变可能是心肌肥厚和心肌损伤的一个关键促进因素；Rho／ROCK／profilin．1介导肌动蛋白纤维的聚合，导致细胞骨架结构重构，推测该通路可能在DCM中起作用。目前未见profilin．1与DCM的相关研究。本研究拟建立AGEs诱导的

6、大鼠心肌损伤模型，观察心肌组织形态和功能变化、心肌纤维化、心肌损伤及各种细胞因子的变化以及profilin．1的表达；应用shRNA腺病毒沉默PROFILIN．1基因表达技术，观察干预后对AGEs诱导心肌病变的影响，直接论证profilin．1在AGEs诱导的心肌损伤中的关键作用；探寻糖尿病心肌病变的防治靶点，为开发和研制新药提供理论依据。万方数据硕士学位论文中文摘要方法配制AGEs；构建沉默PROFILIN．1基因shRNA腺病毒载体。将SD大鼠随机分组：正常对照组(control组)：连续尾静脉注射生理盐水：AGEs组：连续尾

7、静脉注射AGEs(25mg／kg)；AGEs+shProfilin一1组：间断心尖注射PFNlshRNA及连续尾静脉注射AGEs(25mg／kg)：空病毒组(emptyviruscontrol组)：间断心尖注射无处理的载体腺病毒。8周后行心电图检查，观察心电图变化，快速测糖法测量空腹血糖；处死大鼠取血清测ICAM．1、ADMA、MDA水平；取心肌组织行HE染色观察心肌病变；心肌免疫组化观察profilin．1蛋白表达情况；提取心肌蛋白并通过WesternBlot检测profilin-1、Rho、NF—KB蛋白表达情况：提取心肌组织

8、RNA并通过RT．PCR检测profilin-1mRNA、MIVIP．2mRNA、MMP．9mRNA表达情况。结果(1)PFNlshRNA干扰腺病毒的细胞感染效率验证结果示腺病毒载体构建成功。(2)心电图示AGEs组T波下降幅度与control组明显增大，且有统计学意义，P<0．05。(3)心肌组织HE染色显示(400x)：相较于control组，AGEs组心肌细胞排列紊乱，胞质浑浊；胞核增大，核深染，部分心肌细胞出现核边集；心肌间质纤维增多，排列紊乱，细胞间隙充盈，可见炎性细胞浸润。shProfilin．1组同AGEs组比较细胞

9、排列较规律，无明显水肿，胞核清晰，心肌间质无明显增生及炎性细胞浸润。(4)心肌免疫组化(400x)示AGEs组与对照组相比，profilin-1高表达，P<0．01；shProfilin一1组与AGEs组相比，万方数据硕士!学位论文中文摘要prof