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时间:2019-02-24
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1、密级Pl3K/Akt信号通路对小胶质细胞功能及其膜表面TNFR表达的影响EffectofP13K/AktSignalingPathwayontheFunctionandTNFRExpressionofMicroglia杨双双计:学位论文:34页表格:4个插图:7幅指导教师:李丹清教授申请学位级别:硕士学位学科(专业):内科学培养单位:大连医科大学附属第二医院完成时间:二O一四年四月答辩委员会主席:独创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文是本人在指导教师指导下进行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特别加以
2、标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得大连医科大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字Et期:独!蛑—£月-三旦日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影
3、印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“√”):1.保密口,在~年解密后适用本授权书。2.不保密口。作者签名:俩导师签名:日期:加,眸r月为曰日期:年月日目录一、摘要(一)中文摘要............................⋯.........1(二)英文摘要...⋯.....⋯.⋯⋯..⋯.⋯..⋯.⋯.3二、正文/\—LL—LL一)IU吾⋯..⋯⋯..⋯⋯..⋯....⋯..⋯........5(二)实验材料和仪器⋯....⋯..⋯.......⋯
4、..⋯.....6(--)实验方法.......⋯.⋯...⋯⋯.....⋯......⋯.7(四)实验结果⋯⋯.....⋯....⋯.......⋯........1l(五)讨论.....⋯....⋯......⋯...................16(六)结论.⋯....⋯..........⋯⋯...⋯⋯.......19(七)参考文献.................⋯⋯......⋯.......20三、综述(一)综述.⋯......。......⋯..⋯⋯....⋯⋯.⋯.23(二)参考文献
5、.........................⋯....⋯....30四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.34大连医科大学硕士学位论文PI3K/Akt信号通路对小胶质细胞功能及其膜表面TNFR表达的影响硕士生姓名;杨双双指导教师:李丹清教授专业名称:内科学摘要目的:观察P13K/Akt信号通路对小胶质细胞功能及其膜表面TNFR表达的影响,探讨小胶质细胞功能状态变化的可能机制。方法:用BV2和PCI2两种细胞株分别代表小胶质细胞和神经元。评价小胶质细胞功能的体系是应用BV2细胞的培养液培养PCI2细胞
6、,通过MTT法检测PCI2细胞存活率来反映BV2细胞功能。为明确P13K/Akt信号通路对小胶质细胞功能的影响,将PCI2细胞分为:常氧培养组、常氧过氧化氢损伤组、低氧培养组及低氧P13K/Akt信号通路阻滞剂组。为明确不同功能状态小胶质细胞P13K/Akt信号通路对TNFR表达的影响,将BV2细胞分为:常氧培养组,低氧培养组及低氧P13K/Akt信号通路阻滞剂组。应用Westernblot法检测P13K/Akt信号通路Akt蛋白及其磷酸化水平和TNFR蛋白的表达。结果:1.以常氧培养组PCI2细胞存活率为
7、100%来计算,常氧过氧化氢损伤组PCI2细胞的存活率为51.13+1.24%。分别低氧1.5h、4h、8h、14hPCI2细胞存活率对应为78.41士2.23%、51.604-0.5l%、33.634-1.02%、23.62士2.91%,与常氧过氧化氢损伤组比较,细胞存活率在低氧1.5h组显著提高,低氧8h及以上组显著下降,(P8、44-1.73%、11.024-1.76%。2.常氧培养组BV2细胞p-Akt蛋白表达量为65.944-1.66。低氧1.5h、4h、8h、14hp-Akt表达量分别为74.154-2.69、68.45+1.68、45.664-2.36、42.814-1.05,与常氧培养组比较,p-Akt表达量低氧1.5h组明显增高,低氧8h及以上组显著下降(P<0.05)。大连医科大学硕士学位论文3.常氧条件下BV2细胞TNF
8、44-1.73%、11.024-1.76%。2.常氧培养组BV2细胞p-Akt蛋白表达量为65.944-1.66。低氧1.5h、4h、8h、14hp-Akt表达量分别为74.154-2.69、68.45+1.68、45.664-2.36、42.814-1.05,与常氧培养组比较,p-Akt表达量低氧1.5h组明显增高,低氧8h及以上组显著下降(P<0.05)。大连医科大学硕士学位论文3.常氧条件下BV2细胞TNF
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