小麦根蛋白提取与双向电泳方法的优化与应用

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1、Seediscussions,stats,andauthorprofilesforthispublicationat:https://www.researchgate.net/publication/263521519OptimizationandApplicationonTwo-dimensionalElectrophoresisforWheatRootProteomicStudyArticle·January2010CITATIONSREADS0276authors,including:KeWangChineseAcademyofAgriculturalSciences71PUBLICA

2、TIONS503CITATIONSSEEPROFILESomeoftheauthorsofthispublicationarealsoworkingontheserelatedprojects:wheattransformationViewprojectAllcontentfollowingthispagewasuploadedbyKeWangon25March2015.Theuserhasrequestedenhancementofthedownloadedfile.万方数据植物遗传资源学报2010,11(2):244·248JournalofPlantGeneticResources小麦

3、根蛋白提取与双向电泳方法的优化与应用郭广芳,董坤,高利艳,王顺利,王轲,晏月明(首都师范大学生命科学学院,北京100048)摘要:为了建立一套适合小麦根蛋白质组分析的双向电泳系统(2-DE),得到更加清晰的电泳图谱,本研究以小麦幼苗根系为材料,对根蛋白的提取方法、上样量等进行了优化。研究发现,上样量为1200ttg时,Trizol抽提法提取的蛋白能够获得图像清晰、分辨率高、重复性好的双向电泳图谱,基本满足小麦根系蛋白质组学的分析和研究。关键词:小麦根系;蛋白质组;双向电泳;Trizol抽提法OptimizationandApplicationonTwo·DimensionalElectrop

4、horesisforWheatRootProteomicStudyGUOGuang—fang,DONGKun,GAOLi-yan,WANGShun-li,WANGKe,YANYue·ruing(CollegeofLifeScience,CapitalNormalUniversity,Beijing100048)Abstract:Todevelopanefficientandhighresolution2一DEprocedureforwheatrootproteomicanalysis,themethodofwheatrootproteinextractionandsamplepreparat

5、ionfortwo·dimensionalgelelectrophoresis(2-DE)wereoptimizedbyusingtherootsofwheateultivarsJing一411andChineseSpringattwoleavesstage.Separationresultsofwheatrootproteinbyusingtheoptimizedmethodshowedthatbetterresolutionoftheelectrophoresispatternscouldbeachieved.Inparticular,theproteinsamplesextracted

6、fromTrizolreagentappearedtobebetterfortwo-dimension—algelelectrophoresisseparation,whichcouldbeusedasanimportanttoolforthestudiesonthewheatrootpro-teome.Keywords:Wheatroot;Proteome;Two-dimensionalelectrophoresis(2一DE);Trizolextraction小麦是世界上广泛种植的主要粮食作物之一,全球每年需求量大约为6亿t,并且逐年增加,但是由于环境恶化、耕地减少等不利因素严重制约着小

7、麦产量的增加⋯。因此,改善小麦自身抗逆性成为提高小麦产量和品质的重要途径。小麦根系直接与土壤环境相接触,吸收水分和矿质营养,在不同环境和不同的发育时期蛋白质组会发生明显的变化旧·。近年来利用双向电泳和质谱等蛋白质组学方法对小麦幼苗根系蛋白质组的研究逐渐成为热点p4-。转录水平上提供的信息并不能完全确定基因的功能,蛋白质才是生命现象的直接体现者和生理功能的最终执行者。蛋白质组最早由Wilkins和William

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