akt-yap信号通路在谷氨酰胺饥饿诱导hela细胞凋亡过程中的作用研究

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1、学位论文独创性篱明奉太郑囊声鞭：所提交∞学馑论文是搴入程。锴烯黝携铮“F，独吏进行硪究工作所取搿的威果。除文中醴经涟鞲孳哺《艉内容外，本论文不台獒他个入或集体已甄发裘鲮撰写过国研究成累+也不禽为获得苏州火攀或其它教蠢枫构麴学佼谖书瓤使用过自哿材料。对本文的研宽缴渤艇要雯激的个人和集体，均已在文中以明确方式撅嗡。零A承缒声嘲麴法律黉任。论文攥嚣鹳蕴堕虫淌：鬻丝堕!曼擎学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的肌：k-IiI定，即：学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电二予文档的内容和纸质论文的内容相～致。苏州大学有权向圜家图书馆、中嘲社科院文

2、献信息情报中心、中圈科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期列(光盘版)电。予杂志社送交本学位论文的复印件和电“f文档，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印域其他复制手段保存和江：编学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据露进行检索。涉密论文口，在——年——月解密弱适用奉规定：讲≯爹密论之√论文弹j者签名樾j霸：翌!望!三：拳甲导9承签名：三酲监目期：及』筻丛：。驴Akt．YAP信号通路在谷氨酰胺饥饿诱导Hela细胞凋亡过程中的作用研究中文摘要Akt—YAP信号通路在谷氨酰胺饥饿诱导Hela细胞凋亡过程中的作用研究中文摘要目的：研究谷氨酰胺

3、(glutamine，Gin)饥饿对细胞生长及活力的影响，探讨Akt-YAP(proteinkinaseB—Yes-associatedprotein)信号通路在Gin调节细胞凋亡过程中的作用机制。方法：以体外培养的Hela细胞作为实验对象。首先用不同浓度胎牛血清(fetalbovineserum，FBS)和Gin(10％FBS+4mMGln、10％FBS+GIn．Free、FBS．Free+4mMGin、FBS．Free+Gin．Free)分别培养Hela细胞24h和48h，细胞计数法检测细胞的增殖情况；不同浓度Gin(4、2、1、O．5、0．1、0mM)培养Hela

4、细胞24h，CCK．8检测细胞活性，Westemblot检测Bax蛋白的表达；不同浓度Gin(4、2、1、0．5、O．1、0mM)或Gin4mM、Gin0mM和Akt抑制剂LY29400240pM+Gin4mM分别培养Hela细胞24h，Westernblot检测pAkt和Bax蛋白的表达；不同浓度Gin(4、2、1、0．5、0．1、0mM)培养Hela细胞24h，Westemblot检测pYAP和YAP蛋白的表达；利用siRNA干扰Hela细胞YAP蛋白的表达，Gin4mM或0mM分别培养正常细胞或转染后的细胞24h，Westernblot检测Bax蛋白的表达；分别用

5、Gin4mM、Gin0mM和Akt抑制剂LY294002409M+Gin4mM培养细胞24h，Westernblot检测pYAP蛋白及胞浆和胞核YAP蛋白的表达。结果：不论是否添加FBS，不含Gin的培养基细胞生长速度缓慢，细胞数量显著降低(P<0．05)；低浓度Gin(0．5、0．1、0mM)组细胞活性明显下降(P

6、亡过程中的作用研究Gin饥饿诱导的Bax蛋白的表达；Gln饥饿和Akt抑制剂均降低了pYAP蛋白的表达，增加了核内YAP蛋白的表达。结论：Gin饥饿抑制了Hela细胞的生长及细胞活性，诱导了Hela细胞凋亡；Akt．YAP信号通路参与了Gin饥饿诱导的Hela细胞的凋亡。关键词：谷氨酰胺；凋亡；蛋白激酶B；Yes相关蛋白II作者：齐梦迭指导老师：王学敏EffectsofAkt-YAPsignalingpathwayonglutaminedeprivationinducedapoptosisinHelacellsAbstractofAkt--YAPsignalingpat

7、hwayonglutaminedeorivationinducedpootosis‘HelacellsdeorlvUcetlapoptoslsinacellsHAbstractobjective：Toinvestigatetheeffectsofglutaminestarvationoncellgrowthandviability，andtoexplorethemechanismofAkt-YAPsignalingpathwayintheprocessofglutamineonapoptosis．Methods：Helacellscult