bcsg1在食管癌中的表达及其对细胞侵袭力影响的研究

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1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名矧觚导师研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。

2、本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：多‰导师签中文摘要BCSGl在食管癌中的表达及其对细胞侵袭力影响的研究摘要目的：BCSGl(breastcancerspecificgene1)是1997由Ji等用表达序列标签cDNA差异测序的方法分离克隆出的一组新的人类基因，属synuclein家族成员。研究证实其在正常乳腺和良性病变中几乎不表达，在浸润性乳腺癌或晚期乳腺癌中高表达，并且其高表达促进乳腺癌细胞的生长、浸润和转移，因此人们开始认为BCSGl是乳腺癌所特有的并称之为乳腺癌特异基因。国外文献报道该基因在包括肝脏、食管、结肠、胃、肺、前列腺、宫颈、乳

3、腺在内的恶性肿瘤组织中均存在表达，在癌周正常组织表达少见，并且BCSGl蛋白表达与分期相关，I期表达水平低，II到Ⅳ期表达水平增高，是与肿瘤恶性进展有关的标记物。众所周知，食管癌是我省高发的消化道肿瘤，目前，BCSGl在食管癌发生发展中的作用机制尚未见报道。本研究采用免疫组织化学方法检测BCSGl在食管癌中的表达及其与临床病理学因素的关系，并进～步在BCSGl低表达的食管癌细胞株中导入外源性BCSGI，研究该基因表达上调对食管癌细胞侵袭力的影响，以揭示其在食管癌发生发展中的生物学功能和机制。方法1随机抽取河北医科大学第四医院2006年1月至12月期间收治

4、的临床病例资料完整的食管癌石蜡标本30例，重中文摘要新制备切片，行免疫组织化学染色检测BCSGl蛋白表达情况。其中男性22例，女性8例，年龄32岁．70岁，中位年龄59岁。按肿瘤组织分化程度分类：低分化7例，中分化13例，高分化10例。全部病例均经病理学确诊，其中鳞癌23例，腺癌5例，小细胞未分化癌1例，其他类型l例。临床分期采用TNM分期，其中I期5例，II期4例，III期12例，1V期9例。所有患者术前均未行化放疗。应用SPSSl3．0统计软件进行分析，以P<0．05为检验标准。计数资料中的差异性分析使用卡方检验。2培养4株食管癌细胞Eca．109、

5、TEl、TEl0、KYSE450，采用逆转录．聚合酶链反应(RT．PCR)方法测定4株食管癌细胞株中BCSGlmRNA表达水平，选取表达水平较低的细胞株做为研究对象。3对BCSGlmRNA低表达的细胞株，采用脂质体转染法瞬时转染包含BCSGlcDNA全长的重组质粒PCDNA3．0．BCSGl和空质粒PCDNA3．0，分别设为重组质粒转染组和空质粒转染组，同时以未转染细胞作为空白对照。转染48小时后，应用逆转录．聚合酶链反应(ImPCR)方法检测三组细胞BCSGlmRNA的表达水平，流式细胞学技术(FCM)检测三组细胞BCSGl蛋白表达水平。利用Trans

6、well体外侵袭实验检测细胞侵袭力的变化。结果1免疫组化显示30例食管癌组织中BCSGl阳性表达率为83．3％(25／30)，BCSGl表达与淋巴结转移、TNM分期呈正相关(PO．05)。2BCSGl在4株食管癌细胞Eca一109、TEl、TEl0、KYSE450中均有不同程度的表达，其中Eca．109细胞株BCSGlmRNA表达水平最低。3在BCSGlmRNA低表达细胞株Eca．

7、109中瞬时转染含BCSGlcDNA全长的重组质粒，经检测转染后BCSGlmRNA水平和蛋白水平均显著增高，与空质粒转染组和未转染Eca．109细胞相比有显著差异(PO．05)。Transwell体外侵袭实验示重组质粒转染组穿膜细胞数(167．3+2．51)较空载体转染组(65士2．65)和未转染组(70+2．52)IjJ]显增加(PO．05)。结论1BCSGl在食管癌组织中存在高表达，且表达水平与淋巴结转移、TNM分期呈正相关。就分化程度而言，似乎存在随分化程度的降低，B

8、CSGl表达水平增高的趋势。BCSGl有可能作为评价食管癌预后的一个候选分子指标