hcc中pcdh10甲基化与hbv的相关性探讨

《hcc中pcdh10甲基化与hbv的相关性探讨》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、重庆医科大学硕士学位论文HCC中PCDH10甲基化与HBV的相关性探讨姓名：范颂申请学位级别：硕士专业：临床检验诊断学指导教师：张莉萍201205重庆医科大学硕士研究生学位论文HCC中PCDHl0甲基化与I珂V的相关性探讨摘要肝细胞型肝癌(h印atocellularcarcinoma，HCC)以其恶性程度高，病情进展快为特点【l】，致死率分别占我国男、女性恶性肿瘤死亡构成比的第三和第四位网。因此，为降低HCC的发病率和死亡率，迫切需要对HCC进行早期诊断和预防，并在此基础上进一步探讨新的治疗策略。肝癌的发生

2、是机体肝细胞内基因组遗传学和表观遗传学水平的累积异常相互协调作用的结果‘3羽。作为诱导肝细胞癌形成的最危险的致病因子p，81，慢性乙型肝炎病毒(h印撕tisBvims，HBV)感染常与机体内发生的表观遗传学改变密切相关。由船V编码的癌蛋白HBx介导的抑癌基因(tuIIlorsuppressorg锄e，TSG)启动子区发生高甲基化是导致多类TSG失活的重要机制‘9’101，这些基因启动子发生高甲基化是肿瘤发生过程中的关键。因此，鉴定由HBV／耶x介导的甲基化分子生物学标记物对HBV感染相关性HCC的早期监测、

3、诊断及靶向治疗均具有重要意义。人类PCDHlO基因，即OL．protocadlle血，位于4q28．3，是新被界定的一类钙粘蛋白亚家族中一员，具有维持同源细胞之间粘附性的重要作用‘11，12】。研究表明，PCDHlO是一类新型的抑癌基因，PCDHl0高表达具有显著抑制人类多种肿瘤细胞生长、恶化、浸润和转移的生物学功能‘13】。PCDHlO基因所在的位点经常在肝癌，结肠癌，前列腺癌和胰腺癌【14‘171等多类肿瘤中缺失。目前，PCDHlO基因重庆医科大学硕士研究生学位论文启动子区在多类肿瘤中存在高甲基化，在肝

4、癌中发生甲基化失活亦有初步报道【131，但是关于慢性HBV感染或HBx与PCDHlO基因发生甲基化之间的关系至今尚未研究。本课题拟以各种肝癌细胞株、肝癌组织和表达HBx蛋白的H印G2为研究模型，采用逆转录PCR(RT-PCR)及荧光定量逆转录PCR(FQI弭PCR)技术、甲基化特异性PCR(MSP)、亚硫酸盐基因组测序(BGS)等技术，研究表观遗传调控因子船x与PCDHlO基因启动子发生甲基化、转录下调的相关性，从而为HBV感染致肝癌的机制研究提供新的方向和思路。研究结果显示：相比正常肝组织，PCDHlO基

5、因的mRNA在9株人肝癌细胞中表达下降，其中在人肝癌细胞株HepG2、Hull4、Hull7和Snu449细胞中PCDHlO基因转录完全失活，在Hlllll、Hull6、M拙aⅦ、PLC／PRF／5和Snu397细胞中PCDHlOmI斟A水平呈不同程度下降。运用去甲基化药物Aza处理H印G2细胞可以部分下调PCDHlO的甲基化程度，从而恢复PCDHlO基因的mIⅢA表达。临床组织标本检测结果显示：50例肝细胞癌患者癌和对应癌旁组织及6例正常对照肝组织中PCDHlO的甲基化比率分别为76％(38／50)、40

6、％(20／50)和O，相应地，PCDHlOmRNA水平下调的比率依次为64％(32／50)，30％(15／50)和O。HCC癌组织(p<0．01)、癌旁组织(pO．05)。、同时，在A

7、d-HBx感染的HepG2细胞中，HBX表达也未对PCDHlO启动子甲基化程度产生影响。另外，结合所研究肝癌患者的临床资料进行统计，我们发现，临床组织标本中PCDHlO的甲基化状态与HCC患者年龄、性别、饮酒史、HBV感染状态及肝硬化无关(p>O．05)。而与患者AFP水平、肿瘤大小、分期(p

8、胞肝癌；PCDHlO基因；甲基化；HBv感染；HBx重庆医科大学硕士研究生学位论文METHYIATIoNoFPRoToCADHERIN10INHEPATOCELLULARCARCINOMLAANDITSREIATIONSHIPWITHHEPATITISBVIRUSABSTRACTH印atoCelhdarcarCinoma(HCC)isCharact嘶zedbyMghlymali萨antwimrapidprogre